ECM BIOSCIENCES的A431细胞裂解液
A431细胞在细胞表面表达约106种表皮生长因子(EGF)受体。在用EGF刺激后,A431细胞的EGF受体磷酸化水平显着增加,随后激活了主要的细胞信号传导途径,例如PKB / Akt和MAP激酶途径。在EGF刺激后的不同时间点,这些细胞信号通路的下游,各种细胞骨架,细胞质和核蛋白被磷酸化。
在含有10%胎牛血清的DMEM中生长的A431细胞的融合培养物在1%SDS,1.0 mM原钒酸钠,10 mM Tris(pH 7.4)缓冲液中裂解。在稀释至最终浓度和缓冲液之前,使用BCA方法(Pierce)确定蛋白质浓度。