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Pre-madefireflyluciferseandGFPexpressionAdenovirus.FireflyluciferaseandGFPare bicistronicallyexpressedunderthesame suCMVpromoter,mediatedbya2Aelementwhichallowsexpressingtwoindividualtargets(notasfusion-target).
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Cat#:AVP004
GentargetInTag™跨膜蛋白什么是InTag™跨膜蛋白?GenTarget的InTag TM高效蛋白质递送系统使您可以将蛋白质直接引入细胞,其效率比poly-A融合标签高10到40倍,而对蛋白质功能几乎没有影响。InTag TM蛋白递送方法的优点:高效的蛋白质输送–功能分析所需的蛋白质更少能够传递大蛋白(> 1000个氨基酸)与细胞类型无关—可以与许多不同的哺乳动物细胞一起使用快速交付,可轻松获得蛋白质功能(<5分钟)蛋白质功能的可逆传递非侵入性递送—只需添加到细胞培养中可控制的递送-通过改变浓度与靶向蛋白融合后的靶向递送 将蛋白质直接引入细胞是研究蛋白质功能的关键步骤。与DNA转染不同,在DNA转染中,将转录活性基因导入通过细胞机制制造蛋白质的活细胞中,蛋白质递送不会引入任何外源DNA,并且与细胞转录和翻译机制无关。因此,它避免了在宿主基因组中发生插入诱变的潜在风险,并且所传递的蛋白质在进入细胞后立即起作用。已经开发了几种蛋白质递送方法,包括电穿孔,显微注射,蛋白质融合和传统的阳离子脂质载体。在这些方法中,蛋白质融合传递 无疑是最容易与非细胞毒性蛋白质一起使用的方法, 并且适用于大规模应用。因此,这是最有吸引力的治疗方法。蛋白质融合递送取决于被称为蛋白质转导结构域(PTD)的短阳离子肽,该肽与目标蛋白质融合。通常包含多个(7〜15)精氨酸的PTD可以通过不完全了解的机制有效地穿过质膜。在许多病毒蛋白中发现的天然PTDs具有转运质膜的能力。其中包括来自HIV-1的TAT蛋白,流感病毒血凝素蛋白(HA2),单纯疱疹病毒1(HSV-1)DNA结合蛋白VP22和果蝇触角(Antp)同源转录因子。根据噬菌体筛选和点突变筛选的结果,GenTarget已开发出InTag TM,这是一种专有的高效蛋白质递送系统,采用了工程化的PTD。根据细胞类型的不同,具有37个氨基酸的InTag TM PTD对靶蛋白功能几乎没有影响,并且显示出比聚精氨酸融合标签高10到40倍的效率。与InTag TM PTD 融合的靶蛋白可以有效地传递到各种活细胞中。Gentarget的InTag TM 蛋白质递送结构域已整合到我们的Eco PCR克隆产品(目录号:即将推出)中,可用于大肠杆菌或哺乳动物表达 转染就绪的蛋白质。纯化后,可以将用InTag TM PTD 表达的蛋白简单地应用于培养的哺乳动物细胞,以进行体外功能测定。GenTarget还提供了许多纯化的,可转染的蛋白(请参阅产品链接)。