货号：	FSQ-101
供应商：	研卉生物
英文名：	ReverTraAceqPCRRTKit
规格：	200T

RealtimePCR用CDNA的逆转录试剂盒大量库存促销
最适用于合成RealtimePCR用cDNA的逆转录试剂盒。

本试剂盒是最适用于RealtimePCR用cDNA制作的逆转录反应试剂盒。由于采用了本公司
高性能逆转录酶『ReverTraAce』，反应效率非常出色。另外，通过改良，使得带入到
RealtimePCR反应体系中的逆转录反应液的影响降到最小，即使在PCR反应体系中添加
了多至20％体积的逆转录反应液，也能表现出良好的反应曲线，因此，最适合用于表达量
较少的mRNA的高灵敏度测试。由于精简了试剂盒的构成，可非常简便地进行操作，仅需
约15分钟的逆转录反应，即可得到充分的cDNA。

 特征1.超群的cDNA合成效率
由于使用了最恰当比例的mixprimer（oligodT和Randomprimer）、以及经改良的反应缓冲液，可实现高效率的逆转录反应。

特征2.反应时间仅需15分钟
逆转录反应仅需15分钟即可完成。此外，即便是要除去对RealtimePCR反应有阻碍的残留的模板RNA，也无须追加RNaseH处理。

特征3.提高了和RealtimePCR试剂的适应性
通过改良，使带入到RealtimePCR反应体系的逆转录反应液的影响降到最小。即使在PCR反应体系中添加了多至20%(V/V)的逆转录反应液，也能表现出良好的反应曲线。因此，最适合用于表达量较少的mRNA的高灵敏度检测。
  实验例1　与用其他公司产品cDNA合成量的比较

实验例2　RNaseH处理与否对检测灵敏度影响的比较

实验例3　模板RNA量的添加量对合成效率影响的探讨

在ReverTraAceqPCRRTKit的反应体系(10μl)中，分别添加HeLa细胞由来的totalRNA0.5μg-0.5pg，分别进行逆转录反应。然后，采用和实验例2同样的方法扩增β-Actin基因。结果可见，在探讨的范围内，模板RNA的量和cDNA的收量密切相关，但无论模板RNA量的多寡，仍可维持很高的cDNA合成效率。由此可见，在目的片段浓度有差异的样品之间，逆转录反应效率的变化并不大，因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。

 

简要备注

Q1.虽然反应时间仅需15分钟，但如果延长反应时间，是否可提高cDNA的合成量？
A1.要对tRNA等高表达量的RNA进行完全逆转录时，延长反应时间可提高合成量，但一般情况下按照标准的推荐条件37℃15分钟即可。

Q2.可使用哪些模板RNA?  
 A2.TotalRNA、mRNA、tRNA、rRNA等各种RNA都可以使用。

Q.3需要进行RNaseH处理吗?  
 A3.由于残留的模板RNA会阻碍PCR反应，所以一般情况下逆转录反应结束后都要通过RNaseH分解模板RNA。但本试剂盒运用本公司开发的新系统，在逆转录反应后可用非酶性方法除去模板RNA。因此，逆转录反应后无需RNaseH处理
参考文献

1）K.Miyazakietal.,J.Bacteriology.,185:2219−2226（2003）
2）A.Nezuetal.,Biochem.J.,263:59−66（2002）
3）S.Nakashimaetal.,J.Biochem.(Tokyo),131:241−246（2002）
4）S.Atsumietal.,EMBOJ.,20:5453−5460（2001）
5）Y.Yabutaetal.,PlantCellPhysiol.,41:666−675（2000）
6）S.Leeetal.,Gene,245:253−266（2000）
 

品名及内容	包装	保存 温度	CodeNo.	价格
ReverTraAceqPCRRTKit 　・5×RTBuffer 　・EnzymeMix 　・PrimerMix 　　(oligodT＋Randomprimer） 　・Nuclease-freeWater	40次份*	-20℃	FSQ-101S	RMB 300
	200次份*×1	-20℃	FSQ-101	RMB 1,500
	200次份*×2	-20℃	FSQ-101B	RMB 2,760
	200次份*×4	-20℃	FSQ-101C	RMB 5,000

*反应体系为10μl时的反应次数。