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保持清洁及宽敞，必要物品，例：试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。(网络信息仅供参考，细胞无菌操作很重要，细胞污染预防等问题可咨询通派细胞库管理员，获取准确的细胞信息)实验用品擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。

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JCB核孔转运时间和效率取决于输入素的浓度:

组成NPC的特征蛋白为糖蛋白gp210和核孔素（nucleoporin,Nup）；糖蛋白gp210为一种跨核膜的N-连接糖蛋白，（通派细胞库供应：Ecv304细胞株）能与伴刀豆球蛋白A强烈结合，作用是将NPC固定于核膜上；

核孔素为一组由8～12种O-连接糖蛋白构成的蛋白家族，（通派细胞库供应：T-24细胞株）与麦胚凝集素(WAG)亲和，广泛分布于NPC孔周围，在细胞质与细胞核内也可检出，作用与生物分子的核质转运有关。

在分子结构上gp210有锚定NPC核膜的结合域及与亲核素蛋白结合的结合域，（通派细胞库供应：Pc-3m细胞株）而核孔素蛋白分子上至少有三类重复序列，其中N末段有FG二肽结构域［3，4］，这些序列都是生物大分子进行核质转运的分子基础。

生物大分子的细胞核质转运过程；在入核转运过程中存在于胞质中的具有核定位信号肽(nuclearlocationsignal,NLS)的转运蛋白（简称NLS蛋白）；（通派细胞库供应：CEF细胞株）首先与NPC附近Importinα结合，Importinα再与Importinβ相结合形成NLS-Importinα/β复合体。

然后NPC内核孔素蛋白通过其自身重复序列与Importinβ结合，（通派细胞库供应：HEB细胞株）并将NLS-Importinα/β复合体定位(docking)在NPC胞质纤丝上，随后胞质纤丝发生弯曲将其复合体依次递呈到细胞NPC中央插销蛋白上，并与核质纤丝发生结合、解离平衡，复合体被送入细胞核内。

复合体在通过NPC中央孔时所耗能量由RanGTPase水解GTP提供，（通派细胞库供应：DT40细胞株）同时激活Importinβ，后者可使Importinα和NLS分别从NLS-Importinα/β复合体上释放下来，NLS分子在核内马达分子(motor)推动下沿核内骨架发生固相传输（solidtransfer）。

核内Importinβ与RanGTP结合成二聚体再转运回胞质，（通派细胞库供应：A549细胞株）胞质中Importinβ/RanGTP二聚体在RanGTPase作用下解离为Importinβ和RanGDP，Importinβ继续参与下一轮NLS蛋白的入核转运；

核内Importinα的出核转运过程较为复杂,（通派细胞库供应：Raw264.7细胞株）首先核内Importinα在CAS蛋白和RanGTP作用下形成三联体转运回胞质，然后三联体在胞质RanGTPase作用下解离为Importinα、CAS和RanGDP。

后胞质Importinα继续参与下一轮NLS蛋白的入核转运过程，CAS则直接返回细胞核内。

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