货号：	40725ES10
供应商：	Yeasen
数量：	大量
英文名：	DiO(DiOC18(3))
保存条件：	-20ºC
规格：	10mg

使用方法
1.染色液制备
（1）配置DMSO或EtOH储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～2mM。
【注】：a、未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，可稳定保存6个月。
b、发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5μM的工作液。
【注】：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。
2.悬浮细胞染色
（1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×10⁶/mL。
（2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（3）孵育结束，按1000～1500rpm离心5min。
（4）倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
（5）重复（3）,（4）步骤两次以上。
3.贴壁细胞的染色
（1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸干培养基。
4.显微镜检测
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a)DiI和DiO＝OmegaXF52，Chroma51004；
b)DiI和DiD＝OmegaXF92，Chroma51007；
c)DiI，DiO和DiD＝OmegaXF93，Chroma61005
表1相关产品性质

产品名称	货号	分子量	Ex/Em	推荐滤光器
DiO	40725ES10	881.7	484/501nm	XF23-Omega,31001-Chroma
DiI	40726ES10	933.87	550/567nm	XF32-Omega,31002-Chroma
DiD	40758ES25	959.91	644/663nm	XF47-Omega,31023-Chroma
DiR	40757ES25	1013.39	748/780nm	XF112-Omega,41009-Chroma

相关产品

产品编号	产品名称	规格	价格（元）
40725ES10	DiO(DiOC18(3))细胞膜绿色荧光探针	10mg	488.00
40725ES25	DiO(DiOC18(3))细胞膜绿色荧光探针	25mg	988.00
40726ES10	DiI(DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针	10mg	398.00
40757ES25	DiRIodide(DiIC18(7))细胞膜深红色荧光探针	25mg	988.00
40758ES25	DiDPerchlorate(DiIC18(5))细胞膜红色荧光探针	25mg	988.00
40772ES25	DiIC16(3)perchlorate细胞膜橙红色荧光探针	25mg	988.00
40718ES50	CelltrackerCM-DiI活细胞示踪剂CM-DiI（红色）	1×50μg	359.00
40718ES60	CelltrackerCM-DiI活细胞示踪剂CM-DiI（红色）	2×50μg	679.00
40718ES72	CelltrackerCM-DiI活细胞示踪剂CM-DiI（红色）	5×50μg	1,289.00