货号：	EY-TG-42-50/100/200
供应商：	科汇生物

石蜡包埋组织DNA提取试剂盒-微量
产品货号：EY-TG-42-50/100/200
包装：50T/100T/200T

石蜡包埋组织DNA提取试剂盒产品介绍

样本直接提取无需脱蜡，方便用户。在产品独有的缓冲液体系的作用下，DNA从石蜡包被样本中快速释放，吸附于高性能的固相基质，洗脱后即可获得高纯度 DNA。提取到的核酸纯度高于市场上的各种同类试剂盒，可适用于多种下游应用。

存储和稳定性

试剂盒（ProteinaseK、RNaseA除外）储存在环境温度-40℃~40℃，相对湿度不大于75%，无腐蚀性气体的避光处。ProteinaseK（固体）和RNaseA（固体）长期保存应置于2~8℃。如两酶溶解后未能短时间用完，应分别按每次用量分装成小份后-20℃保存备用。避免反复冻融造成酶活力下降。
-保质期：12个月。

使用前准备

-阅读说明书，备好必需的试剂和仪器。需自备的试剂、耗材有、无水乙醇、纯水、PBS(10mM，pH7.4，福尔马林固定组织选用)、1.5ml离心管等。全部离心均室温进行。
-若低温导致溶液UL析出沉淀，可在50℃左右水浴中重新溶解，摇匀后使用。
-首次使用前，向每瓶溶液W2中按瓶上标签要求加入指定量的无水乙醇（自备），摇匀后标记备用。每管ProteinaseK或RNaseA首次使用前分别用275μl纯水（自备）完全溶解。
-盒中的1.5ml离心管专用于收集步骤“9”的洗脱液，勿移用。
石蜡包埋组织DNA提取试剂盒提取步骤

1．样本处理
石蜡切片：取石蜡切片（5~10μm厚，1×1cm2大小）2~4张于1.5ml离心管（自备）中。至步骤“2”。石蜡块：取刀片刮取或切成薄片的组织样本2~4mg于1.5ml离心管（自备）中，至步骤“2”。注：尽量剔除石蜡(石蜡不会影响消化但是会使消化体积过大。另外尽量不要使用蜡块样品表面长期暴露于空气中的组织。福尔马林等固定液中的样本：取样本2~4mg，切为数块，置于1.5ml离心管中。用PBS缓冲液重复清洗3次后，至步骤“2”。
PBS清洗方法（单次）：向管中加入500μl   PBS缓冲液(10mM，pH7.4)，涡旋振荡混匀后最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1min，弃去上清。
2.向样本中加入溶液UL300μl（样本应完全浸没于溶液UL中，必要时可短暂离心），80℃孵育60min（期间每15min取出混匀一次）。
3.取出离心管后将其冷却至56℃以下（室温放置2~3min即可），加入
ProteinaseK5μl及RNaseA 5μl，涡旋混匀。置56℃孵育60min或直至组织完全消化。
4.加入000--300μl，涡旋15sec，最高转速（12000g或13000rpm以
上）离心5min。取出离心管，取上层清液至1.5ml离心管（自备）中，
加入清液1.1倍体积的无水乙醇，涡旋混匀。注意！勿吸入上层清液下的杂质，杂质会影响后续试验。
5.将混匀液全部移入套有收集管的微量离心柱中，最高转速（12000g或
13000rpm以上）离心1min。取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回收集管中。
6.向离心柱中加入250μl溶液W2，最高转速（12000g或13000rpm以上）离心30sec。取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回。
7.重复步骤“6”一次。
8.最高转速（12000g或13000rpm以上）离心2min。
9.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向离心柱中加入5~20μl溶液TE，室温静置2~3min，最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1min。DNA溶液即被收集在1.5ml离心管中。
注：将溶液TE预热至50~60℃时使用，可提高洗脱效率。
【注意事项】
-按说明书内容进行操作，违规操作可能导致实验失败。
-盒中试剂如不慎溅到皮肤或粘膜时，立即用大量清水冲洗。
-仅用于科学研究。