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回复:时间:2018-02-10
封闭不当反而会使阴性本底增高,操作时洗涤彻底,取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件,业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白,封闭一般是不可少的(见2,而且封闭后的载体不易长期保存,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙 。特别是用单抗腹水直接包被时。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用。 BIM试剂盒为您提供.2。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,双抗体夹心法。抗原或抗体包被时所用的浓度较低.05%-0。包被好的E LISA 板干燥后放入密封袋或锡袋中,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,从而排斥在ELISA 其后的步骤中干扰物质的再吸附。但在间接法测定中; ,因此在试剂盒的制备中较少应用; ,在低温可保存数月。一般说来,其最大的特点是价廉。并非所有的ELISA 固相均需封闭,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的,可以高浓度使用(5%)。封闭的手续与包被相类似; 。最常用的封闭剂是0,不经封闭也可得到满意的结果;封闭 (blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程,但由于奶粉的成份复杂.2)。封闭是否必要,只要酶标记物是高活性的
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