CouplingAntibodiestoProteinAorG

• use2mgofantibodypermlwetbeads(useappropriateantibody/proteinAorGcombination)
• mixantibodieswithbeadsandbindatroomtemperatureforatleast1hr(onroller)
• washthebeadstwicewith10volumesboratebuffer,spineachtime3minat4000rpm
• resUSPendbeadsin10volumesboratebuffer
• removeequivalentof10µlbeads(=beforesample)
• addsolidDMP(dimethylpimelimidate)toafinalconcentrationof20mM[52mgfor10ml]
• mixonrollerfor30minatroomtemperature
• removeequivalentof10µlbeads(=aftersample)
• stopreactionbywashingthebeadstwicein0.2MethanolaminepH8.0
• incubateonrollerfor2hratroomtemperaturein0.2MethanolaminepH8.0
• washbeadstwicewithPbs
• beadscanbestoredinPbsat4°C
• checkcouplingbyanalysingthebeforeandtheaftersampleona10%SDSgel

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