iTRAQ/TMT同位素标记定量蛋白质组学技术服务
服务简介：

iTRAQ(IsobaricTagforRelativeAbsoluteQuantitation)和TMT(TandemMassTags)技术是分别由美国ABSCIEX公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较多达10种不同样本中蛋白质的相对含量。

技术原理：

iTRAQ/TMT试剂由三部分组成：报告基团、平衡基团和反应基团。反应基团形成2-10种等质量同位素标签。iTRAQ/TMT试剂标记酶解后的肽段，可与氨基酸N端及侧链的伯胺基团发生反应。在一级谱图中，来自于不同样本的同一肽段，标记后表现为相同的质荷比。在二级谱图中，报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂，带不同同位素标签的同一肽段产生质量不同的报告离子，根据报告离子的丰度可获得样本间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

技术特点：

1、较双向电泳（2DElectrophoresis）优势

iTRAQ/TMT技术不仅可以发现到更多的胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白和胞外蛋白，同时还可以检测到2D技术较难发现的低丰度蛋白、疏水性蛋白、等电点极酸和极碱蛋白、分子量极低极高蛋白（小于10kDa或大于200KDa）。

2、分析时间快、实验误差小

可在一次实验中同时完成最多8组样本的比较，不仅减少了实验误差和缩短了实验周期，而且增加了实验统计的相关性。

3、分析范围广

iTRAQ/TMT试剂几乎可以与样本中所有的蛋白结合，同时因为是体外标记，所以对各种动植物组织、微生物、血液、体液、细胞培养物以及分泌物等样本均可进行分析。

4、可信度高

现代串联质谱具备扫描速度快、精度高等特点，使其二级碎片离子信号增强，产生质量更高的二级质谱，确保鉴定结果高的可信度。同时，标记试剂的报告离子的相对分子质量较低（均不超过121），低分子量区是质谱定性和定量较为准确的区域，因此检测结果更为灵敏可靠。

5、翻译后修饰分析

保留了肽段转录后修饰的状态，因此可对磷酸化蛋白等翻译后修饰蛋白进行定性和定量研究。

样品要求：

1、最好送原始样本，除非客户有成熟的蛋白质组学的蛋白提取方法。

2、动物组织样品：湿重不少于200mg，样品不能溶血，取材后用PBS冲洗3遍去除血液。

3、植物组织样品：湿重不少于1g，取材后用PBS冲洗3遍去除杂质污染。

4、菌体样品：原则上只接受常见无毒菌的菌体样品，菌体沉淀不少于100mg或者体积不少于100μL；若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液，按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。

5、细胞样品：收集细胞沉淀，PBS冲洗3遍，送样量为5×106或细胞沉淀不少于50μL。

6、培养基上清液：需保证无菌体或细胞（用0.2μm膜过滤），有条件的话可浓缩后再寄送；送样体积不少于10ml。

7、血清样品：新鲜血液取出后，4℃，2000g，离心15min，取上清，即得血清；血清制备过程中保证不能溶血；血清体积要求不少于500μl；制备血清过程中，客户可根据自己的样品和实验要求选择是否添加抗凝剂，一般不用添加。

8、若客户直接提供蛋白，则蛋白量不少于1mg，浓度不低于2mg/mL。

厚百生物商城iTRAQ/TMT同位素标记定量蛋白质组学技术服务详情页面：http://www.holdbio.com//product.action?goodsid=79798

如您需要本项技术服务，欢迎通过以下联系方式与技术人员直接沟通。

电话：025-52333444转8812

企业QQ：2851265199