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蚂蚁淘百科知识:了解凝胶成像
凝胶成像即:对DNA或RNA胶进行切胶、拍照、观察、分析的实验室类仪器,凝胶成像系统可以应用于分子量计算、密度扫描、密度定量、PCR定量等生物工程常规研究。
中文名
凝胶成像
分子量定量
对于一般常用的DNA胶片
密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧
密度扫描
在分子生物学和生物工程研
总体上来说凝胶成像可应用于:凝胶成像系统可以用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析
(1)分子量定量
对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNAMarker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。
(2)密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PAGE蛋白胶条带的浓度测定。
(3)密度扫描
在分子生物学和生物工程研究中,最常用到的是对蛋白表达产物占整个菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法是利用专用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的凝胶成像就能完成此项工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR实验扩增出来的条带不是一条,那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言,与密度扫描类似,但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数,密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。
普通凝胶成像分析系统:可以对蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:EB、SYBRGreen、SYBRGold、TexasRed、GelStar、Fluoroscecin、RADIantRed等染色的核酸监测;以及CoomassieBlue、SYPROOrange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。(或UV,EB和有色及可见样品成像);
化学发光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、紫外-荧光、有色及可见样品成像;
多色荧光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像;
多功能活体成像分析系统:UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和离体组织和小型动物,及大型型动物。
荧光及可见光发光成像分析系统:用于荧光、可见光成像,具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型,可以通过硬件升级以支持化学发光成像。
凝胶成像仪属于高科技产品,是需要软、硬件紧密一致配合的高端分子生物分析仪器。主要用于科研、医疗、教学等项目,目前国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多。中国本土企业也掌握了凝胶成像核心技术,性能方面不比进口差,但价格一定比进口的低。进口品牌大致有UVP、伯乐、Wealtec、alpha、DNR、UVI、GE、富士、柯达等,本土品牌有北京赛智、北京六一、君意东方、上海领成、上海天能、上海培清、上海山富、上海复日、上海嘉鹏、上海勤翔、江苏捷达等品牌。
若从外观来说进口的更胜一筹,看起来更华丽;从机器的平行性能(性价比)来看国货更高;对于软件,进口品牌大部分都有自己的软件,本土品牌中大部分没有自己的软件。在国货中有自主软件的企业不多,仍需要进一步的发展。
以某品牌凝胶成像为例:
高分辨率像素:
140万、200万、300高像素专业数字CCD摄像头,分析图像更清晰,分辨率更高。
推拉工作台:
方便装卸清洁,易于实验操作,人性化设计。
密封设计:
可保护操作者免受漏出紫外光的辐射。
先进的暗箱技术,操作安全。
多种光源可选:
可由触措键控制开关的四种淘汰312nmUV、254nmUV、365nmUV及白光,扩展了应用范围。
推拉式工作台:
方便装卸清洁,易于实验操作,人性化设计。
密封设计:可保护操作者免受漏出紫外光的辐射。
先进的暗箱技术,操作安全:
密封效果好保证了图片的获取和UV的传说。
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