化学发光(ChemiLuminescence，简称为CL)分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。

• 中文名

• 化学发光分析法

• 外文名

• ChemiLuminescence

• 简称

• CL

• 分析法

• 分子发光光谱

1. 1简介

2. 2分类

3. 3化学发光分析系统介绍

化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光(光辐射)所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。

化学发光Western杂交检测，是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法。酶标记抗体取代了放射性标记抗体，当它作用于底物时，可产生光信号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)二级抗体耦联物为基础。信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采集。化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史，大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测。随着冷CCD化学发光检测技术的发展，越来越多的实验室都开始采用冷CCD的凝胶成像系统进行化学发光的检测，胶片成像虽然比自然发光法灵敏度更高，但也有很多缺点：耗时，需要暗房，显影剂和胶片，胶片较贵且为需持续购买的消耗品。同时由于胶片的线性范围较窄，因此用胶片上的条带（特别是表达量较低的条带）进行定量几乎不可能。冷CCD技术与X胶片相比具有瞬时影像处理、高灵敏度和高分辨率、动力范围广等优点，因此能对条带进行精确定量。当然这项技术要求底物能产生高强度长持续时间的信号，以保证信号能被冷CCD的凝胶成像系统捕获。在这方面多家公司都提供了相应的化学发光底物或试剂盒，特别是Bio-RadImmun-Star™AP化学发光试剂盒、bio-radWestern-C化学发光检测试剂盒等。Western-C化学发光检测试剂盒底物可产生高强度的持续光信号24小时，因此用户可以进行多次曝光，最低可检测至10-19mol，配合Bio-Rad屡获大奖的化学发光成像系统ChemiDocXRS或VersaDoc系统能得到得到高质量的印记信号^[1-2]。

化学发光分析法分为：

1、普通化学发光分析法(供能反应为一般化学反应)；

2、生物化学发光分析法(供能反应为生物化学反应；简称BCL)；

3、电致化学发光分析法(供能反应为电化学反应，简称ECL)等。

根据测定方法该法又可分为：

a、直接测定CL分析法；

b、偶合反应CL分析法(通过反应的偶合，测定体系中某一组份；

c、时间分辨CL分析法(即利用多组份对同一化学发光反应影响的时间差实现多组份测定)；

d、固相、气相、掖相CL。分析法；

e、酵联免疫CL分析法等。

化学发光系统

在整个的检测系统中其关键的部分为PMT，其直接影响到仪器的检测性能，其最高检测极限为10－22mol/L。不同型号的仪器其检测技术不一样，但基本原理都是利用待测组份与体系的化学发光强度呈线性定量关系，而化学发光强度随体系反应进行的速度增强或衰弱。记录仪记录峰形，以峰高定量，也可以峰面积定量。因化学发光多为闪烁式发光(1—2s左右)，故进样与记录时差短，分析速度快^[3]。

• 参考资料

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• 1.高灵敏度化学发光仪ChemiDocXRS应用心得[心得点评]．生物通[引用日期2014-01-15]

• 2.化学发光仪ChemiDocXRS应用心得．上海大学[引用日期2014-01-15]

• 3.化学发光及生物发光的原理及其应用．生物谷[引用日期2014-01-15]

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