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生物信息学最佳实践–基础篇
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。
中文名
分子杂交仪
外文名
HybridizationOven
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。
广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。
核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。由此可见,进行基因检测有两个必要条件,一是必需的特异的DNA探针;二是必需的基因组DNA。当两者都变性呈单链状态时,就能进行分子杂交。
分子杂交仪HybridizationOven
根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。
1、是用于大容量的分子杂交仪;
2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;
3、用于小容量的核酸杂交仪;
4、微孔板原位杂交仪;
5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;
6、Western杂交仪。
原位分子杂交,斑点分子杂交,所用的分子杂交箱是振荡式的摇床分子杂交箱;Southern、Northern、Western杂交,所用的杂交仪是旋子式杂交仪,仪器采用独特的滚动式反应架装置,配套特制密封杂交管在水平轴上旋转,使杂交管内壁上的杂交反应膜各处能均匀地杂交液反复地接触,充分反应。
功能能齐全的分子杂交仪仪器部件有:箱体、杂交瓶转架或离心管转架、杂交管、摇床、隔膜、电脑控制系统等部件组成。可用于Southern、Northern、Western等分子杂交,还可以用于原位杂交。不同型号的箱体容纳的管子数,微孔版数,载波片数和平板数也不同。分子杂交仪的结构和功能。
功能能齐全的分子杂交仪都有一下功能:微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置,该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶标板或试剂托盘的摆动速度。同时任意选择您所需要的控温温度,瓶架旋转速度,摇床摆动速度。
FYY系列分子杂交仪
该仪器采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。
具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。
温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置。
该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶标板或试剂托盘的摆动速度。
同时任意选择您所需要的控温温度,瓶架旋转速度,摇床摆动速度。
分子杂交仪技术参数
恒温范围:室温5℃-100℃。
温度显示精度:0.1℃
温度均匀性:±0.03℃
杂交瓶转速:0-15转/分或0-24转/分可调
摇床摆动次数:5-50次/分可调
杂交箱容量:直径42mm长150mm(6根)或直径42mm长200mm(6根)或直径42mm长250mm或直径42mm长300mm(6根)。任选
工作室如不用杂交瓶转架,可更换离心管转架。可同时放置1.5ml离心管32支,5ml离心管32支,15ml离心管8支。
工作室尺寸:330×270×310mm。
操作步骤
1.接通电源打开开关,进行参数设定。参数设定,接通电源→按“选择”键到相应的参数行→按“设定”键,该行第一位开始闪烁,进入修改状态→按“置数”键,数字0~9循环到达所需的数字后按“移位”键到下一位数字修改最后修改完后,按“设定”键确认。按“选择”键可选择修改其他数据或回到正常显示状态。
2.达到所设定的温度后按“运行”键试运行30min。
3.按“停止”键然后将所要杂交的东西放到仪器内按“运行”键开始运行。
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