1.用含10％胎牛血清的TNM-FH培养液稀释处于对数生长期的Sf9细胞至约5×10⁵细胞/ml。在噬斑试验之前几小时，以两种不同的密度（2×10⁶和1.5×10⁶细胞/ml）将细胞种于60mm组织培养皿中。对病毒储液的每一稀释度均设复皿（二个组织培养皿），27℃培养。

2.根据病毒储液的来源，用TNM-FH/10％FBS培养液制成5ml病毒储液的系列稀释液。

高滴度病毒储液：10-6、10^-7、10^-8稀释

转染上清（野生型病毒环状DNA）：10^-4、10^-5和10^-6稀释

转染上清（野生型病毒线性化DNA）:10^-1和10^-2稀释

单个噬斑：10^-1、10^-2和10^-3稀释

3.用一根灭菌巴斯德吸管小心从细胞（步骤1）中吸去培养液。每一稀释度的病毒均加1ml至各复皿中27℃温育1h，加入病毒时摇动培养皿以保证病毒能均匀感染细胞。

4.温育1h后，制备琼脂糖顶层覆盖物。

5.用一根灭菌巴斯德吸管吸去病毒上清液，加入4ml琼脂糖覆盖物。让琼脂糖室温固化10～20min(让凝结的水滴散去）。用Parafilm膜分别封住每个平皿（以防干涸），27℃培养6～8天。

6.在噬斑形成较好而且裸眼容易看出的培养皿上，计数每一稀释度形成的噬斑数，计算病毒滴度（pfu/ml）。在10^-7稀释度的培养皿形成10个噬斑或在10^-8稀释度的培养皿形成1个噬斑，病毒滴度计算为10⁸pfu/ml。

7.如果裸眼辨别噬斑时遇到困难，则用台盼蓝染色。制备台盼蓝覆盖物，倾覆1ml至培养了6～8天噬斑形成较好的培养皿中。27℃过夜温育培养皿，让染料扩散进入死细胞，计数蓝色噬斑的数目并确定病毒滴度。（噬斑内的死细胞将吸收台盼蓝染料，噬斑周围的活细胞不会吸收台盼蓝染料。）

确定病毒滴度的另一方案是终点稀释法。采用这种方法，需制备一系列病毒稀释液，并以此感染微量滴定板中的细胞，然后记好每一孔是否存在病毒感染并确定50％终点。然而用这种方法滴定重组病毒储液，得到的结果与噬斑试验相比较难解释。野生型病毒由于包含体的聚集很容易计数，而重组病毒则由于没有包含体有时难以计数。