- [07-26]激素的生理作用及作用特征激素调节信号转导的分子机制幻灯片(北...
- [07-28]Seahorse XFe24 分析仪|
- [10-03]高中人教版生物必修三1.2内环境稳态的重要性课件.ppt
- [08-03]细胞代谢,细胞呼吸有什么区别?
- [10-03]下列有关衰老细胞特征的叙述,不正确的是A. 衰老的细胞新陈代谢...
- [09-22]Cell:细胞代谢的“帮手” | 生物360 中文生命科学界资讯站
- [07-31]当细胞代谢遇到代谢组学
- [10-03]如何加快细胞新陈代谢 加快细胞新陈代谢的好处_养生频道
- [07-23]尿液细胞学检查的注意事项都有哪些?
细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。
(一)原理
细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。
(二)材料与试剂
1.采用BoehringerMannheim公司试剂盒,生物标记的小鼠抗组蛋白单克隆抗
体。
2.过氧化物酶(-POD)标记的小鼠抗DNA单克隆抗体
3.链霉亲合素包被的微孔板
4.DNA-组蛋白复合物,作为阴性对照。
5.ABTS底物
6.溶解缓冲液
7.温育缓冲液
8.底物缓冲液
(三)样品
1.培养细胞或离体细胞的裂解物细胞裂解步骤:收集细胞,离心后,用200µl溶细胞缓冲液重新悬浮,室温下作用30min。
2.培养细胞的上清液
3.血浆(血清)
下一篇:改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容
版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。

