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pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体 |系统生物科学

作者: 时间:2024-09-20 点击量:

pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体使用此 PhiC31 供体载体进行非病毒转基因——使用 CMV 启动子驱动您感兴趣的基因,并选择具有新霉素抗性的整合体非病毒转基因递送单-复制整合在活性位点优先整合插入片段的交付没有大小限制轻松生成细胞系想咨询专家?联系我们或 1-888-266-5066跳到图片库的末尾 \"Loading...\" 跳到图片库的开头产品目录编号DescriptionSizePriceQuantity添加到购物车FC600A-1pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 Donor Vector10 µg$707联系我们Overview Overview

One一步、非病毒、单拷贝转基因

使用一步、非病毒 pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体整合您的启动子和目标基因表达盒成使用 PhiC31 整合酶系统的宿主细胞基因组。只需与 PhiC31 整合酶表达质粒(Cat.# FC200PA-1)共转染,并选择具有新霉素抗性的整合体。您感兴趣的基因将由强大的 CAG 启动子驱动,它在大多数细胞类型中提供组成型表达,包括原代细胞干细胞\"pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo

The PhiC31 整合酶系统

广泛用于基因治疗开发和相关应用,SBI 的 PhiC31 系统的主要优势之一是对拷贝数的严格控制——大多数经历整合事件的克隆都是单插入(支持数据,图 1),降低插入诱变效应的风险。

其他好处包括:

非病毒转基因传递单拷贝整合优先整合在活性位点 插入片段的递送不受大小限制 轻松生成细胞系当您需要非病毒基因递送、具有大插入片段和/或需要受控的单拷贝基因组整合时,请使用 PhiC31 整合酶系统。工作原理如何它的工作原理

使用 PhiC31 整合酶系统进行一步转基因递送

使用 PhiC31 整合酶系统,您只需将感兴趣的基因克隆到 attB 供体质粒中,然后(第 1 步)co -用 PhiC31 整合酶表达质粒转染。 (在细胞内)PhiC31 整合酶瞬时表达,并介导供体质粒上的 attB 位点与基因组中的假 attP 位点之间的位点特异性重组。 (结果)因为伪 attP 位点通常存在于基因组的转录活性位点,您感兴趣的基因可能会整合到基因组的活性区域。

\"一步转基因使用

支持数据支持数据

使用 PhiC31 整合酶系统简化基因传递

\"使用基于

图 1. 使用 PhiC31 整合酶系统,大多数经历整合事件的克隆都有单次插入。基因组 DNA 的 Southern 印迹分析来自用 PhiC31 整合酶表达质粒 (Cat.# FC200PA-1) 和 pCOBLW (CAG-Oct4-Sox2-Klf4-Myc-GFP-SV40-Neo) 共转染的阳性克隆小鼠重编程 PhiC31 供体质粒显示拷贝数16 种不同 iPSC 细胞系的状态。使用两种限制酶后,16 种细胞系中有 14 种显示单次插入 (88%),表明拷贝数紧密r 可以通过 PhiC31 整合酶系统进行控制。

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图 2. PhiC31 整合酶系统有效地将嘌呤霉素抗性标记引入 HEK293 细胞。双启动子 PhiC31 供体载体 pFC-PGK-MCS-EF1-GFP-Puro (Cat.# FC551A-1) 与载体 DNA(顶板)或 PhiC31 整合酶表达质粒(底板)共转染到 HEK293 细胞中三天后将细胞置于嘌呤霉素选择下。再过 11 天后,将细胞固定并用 50% 甲醇加 1% 亚甲蓝的溶液染色,对菌落成像。只有用整合酶共转染的细胞形成菌落(下图),证明了 PhiC31 整合酶系统对转基因熟化的高效性非常。

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图 3.PhiC31 整合酶系统有效地引入了一个HEK293 细胞的嘌呤霉素抗性标记和 GFP。双启动子 PhiC31 供体载体 pFC-PGK-MCS-EF1-GFP-Puro (Cat.# FC551A-1) 与 PhiC31 整合酶表达质粒(底板)共转染到 HEK293 细胞中,细胞在经过嘌呤霉素选择后两天,又过了 4 天和 11 天后细胞成像。相位与荧光成像的比较表明,大多数细胞都强烈表达 GFP 报告基因。

FAQsResources 宣传册:基因传递和表达产品和服务 我们er 手册:PhiC31 集成系统 产品表:PhiC31 集成系统相关产品相关产品 pCOBLW (CAG-Oct4-Sox2-Klf4-Myc-GFP-SV40-Neo) 小鼠重编程 PhiC31 供体质粒立即购买 pFC-MCS-pA-SV40-Neo PhiC31 Donor VectorShop Now pFC-CMV-MCS-pA-SV40-Neo PhiC31 Donor VectorShop Now pFC-CMV-GFP-SV40-Neo Positive Control Donor VectorShop Now pFC-EF1α-MCS-pA-PGK-RFP-T2A-Puro PhiC31 Donor VectorShop 现在购买Now pFC-PGK-MCS-pA-EF1α-GFP-T2A-Puro PhiC31 供体载体立即选购引文spFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体$707.00 产品概述工作原理支持数据常见问题解答资源相关产品引文产品目录编号描述尺寸价格数量添加到购物车FC600A -1pFC-CAG -MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体10 µg$707联系我们概述概述

一步、非病毒、单拷贝转基因

使用一步、非病毒 pFC-CAG- MCS-WPRE-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体使用 PhiC31 整合酶系统将您的启动子和感兴趣的基因表达盒整合到宿主细胞的基因组中。只需与 PhiC31 整合酶表达质粒(Cat.# FC200PA-1)共转染,并选择具有新霉素抗性的整合体。您感兴趣的基因将由强大的 CAG 启动子驱动,它在大多数细胞类型中提供组成型表达,包括原代细胞和干细胞。\"pFC-CAG-MCS-WPRE-pA-SV40-Neo

The PhiC31 整合酶系统

广泛用于基因治疗开发和相关应用,SBI 的 PhiC31 系统的主要优势之一是对拷贝数的严格控制——大多数经历整合事件的克隆都是单插入(支持数据,图 1),降低了插入诱变效应的风险。

其他好处包括:

非病毒转基因传递 单拷贝整合 在活性位点优先整合 插入片段的传递没有大小限制 容易生成细胞系插入和/或需要受控的单拷贝基因组整合,求助于 PhiC31 整合酶系统。工作原理如何工作

使用 PhiC31 整合酶系统进行一步转基因递送

使用 PhiC31 整合酶系统,您只需将感兴趣的基因克隆到 attB 供体质粒中,然后(步骤 1)与 PhiC31 整合酶表达质粒共转染。 (在细胞内)PhiC31 整合酶瞬时表达,并介导供体质粒上的 attB 位点与基因组中的假 attP 位点之间的位点特异性重组。 (结果)因为伪 attP 位点通常存在于基因组的转录活性位点中,您感兴趣的基因很可能会整合到基因组的活性区域中.

\"使用

支持数据支持数据

使用 PhiC31 整合酶系统简化基因传递

\"使用基于

图 1. 使用 PhiC31 整合酶系统,大多数经历整合事件的克隆都有单次插入。对 PhiC31 整合酶表达质粒 (Cat.# FC200PA-1) 和 pCOBLW (CAG-Oct4-Sox2-Klf4-Myc-GFP-SV40-Neo) 小鼠重编程 PhiC31 共转染阳性克隆的基因组 DNA 进行 Southern 印迹分析供体质粒显示 16 种不同 iPSC 细胞系的拷贝数状态。与机器人h 使用的限制性内切酶,16 行中有 14 行显示单次插入 (88%),证明 PhiC31 整合酶系统可实现严格的拷贝数控制。

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图 2. PhiC31 整合酶系统有效地将嘌呤霉素抗性标记引入 HEK293 细胞。双启动子 PhiC31 供体载体 pFC-PGK-MCS-EF1-GFP-Puro (Cat.# FC551A-1) 与载体 DNA(顶板)或 PhiC31 整合酶表达质粒(底板)共转染到 HEK293 细胞中三天后将细胞置于嘌呤霉素选择下。再过 11 天后,将细胞固定并用 50% 甲醇加 1% 亚甲蓝的溶液染色,对菌落成像。仅与整合酶共转染的细胞d 菌落(下图),展示了用于转基因递送的 PhiC31 整合酶系统的高效性。

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图 3。PhiC31 整合酶系统有效地将嘌呤霉素抗性标记和 GFP 引入 HEK293 细胞。双启动子 PhiC31 供体载体 pFC-PGK-MCS-EF1-GFP-Puro (Cat.# FC551A-1) 与 PhiC31 整合酶表达质粒(底板)共转染到 HEK293 细胞中,细胞在经过嘌呤霉素选择后两天,又过了 4 天和 11 天后细胞成像。相位与荧光成像的比较表明,大多数细胞都强烈表达 GFP 报告基因。

FAQsResources 宣传册:Gene 交付和表达产品和服务 用户手册:PhiC31 Integrase System 产品表:PhiC31 Integrase System相关产品相关产品pCOBLW (CAG-Oct4-Sox2-Klf4-Myc-GFP-SV40-Neo) 小鼠重编程 PhiC31 供体质粒立即购买 pFC-MCS-pA-SV40-Neo PhiC31 供体载体立即购买VectorShop Now pFC-CMV-GFP-SV40-Neo 阳性对照供体PhiC31 供体载体立即购买引文

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