首页›细胞信号转导抗体›Histone H4 (tri methyl K20) Monoclonal Antibody [6F8-D9] Sale 当前图像图例： 组蛋白 H4（三甲基 K20）单克隆抗体 [6F8-D9]

货号：IQ558

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数据表主要描述：小鼠抗组蛋白 H4（三甲基 K20）[6F8- D9] 目标抗原：组蛋白 H4（三甲基 K20）目录号：IQ558 数量：0.1mg 浓度：1mg/ml 克隆：6F8-D9 宿主：小鼠同种型：IgG1 骨髓瘤/融合伙伴：X63-Ag8.653 免疫原：人组蛋白 H4 的合成肽（免疫原序列：15-AKRHR(Kme3)VLRDN-25（支链））物种反应性：人类、秀丽隐杆线虫。预计适用于：非洲爪蟾、拟南芥、果蝇（黑腹果蝇）、所有哺乳动物纯化：G 蛋白格式：Puri含有 PBS + 0.1% 叠氮化钠的抗体（来自上清液）应用：斑点印迹、针对内源性蛋白质的 WB、ELISA、ChIP 稀释：最佳抗体稀释应通过滴定确定，但作为指导尝试；WB：以 1:4000 使用。预测分子量：11 kDa。也称为：H4F2 抗体；H4FN 抗体；HIST1H4 抗体；HIST2H4 抗体；HISTH4H4 抗体；甲基组蛋白 H4 抗体；甲基化组蛋白 H4 抗体 Entrez 基因 ID：318846、3771854、3771893、3771908、3771935、3771938、3772509 , 3772519 , 3772666, 3772708, 41773, 3772211, 3772254, 3772314, 3772317, 3772319, 3772325, 3771941, 3771947, 3772096, 3772113, 3772 129, 3772172, 121504, 554313, 8294, 8359, 8360, 8361, 8368, 8370, 8362, 8363 , 8364, 8365, 8366, 8367, 447787 SwissProt ID(s):P59259, P84040, P02304, P62805, P62799 ProtocolsImmunofluorescence protocol - Formaldehyde fixationCollect cells from T.c.unit and remove media from petri dish using suction. 用 1x PBS 清洗并移除在 pr 中孵育细胞e-warm (37°C) 多聚甲醛在轨道摇床上室温下孵育 12 分钟。去除 PFA 并在 1x PBS 中的 0.5% Triton X-100 中室温孵育 5 分钟。准备封闭试剂，这也是抗体稀释剂。在室温下用 1x PBS 洗涤细胞 2 次，每次 4 分钟/在定轨摇床上洗涤。在室温下用 1% NCS 和 1x PBS 封闭 30 分钟。准备一抗（50μl/盖玻片）和潮湿的染色室。在室温下用 1x PBS 洗涤细胞 2 次，然后短暂地风干。在室温下在染色室的黑暗中与一抗孵育 1 小时。在此期间准备二抗。用 1x PBS 洗涤细胞 5 次（更换烧杯 5 次/每个烧杯计数 5 次）在染色室中于室温下在黑暗中用二抗孵育 1 小时。用 1x PBS 洗涤细胞 5 次。Mount在 Dapi 中。

溶液（在染色当天新鲜制备）。

* 1x 磷酸盐缓冲盐水。* 封闭剂：1% NCS 溶于 1x PBS（使用新鲜的 10x PBS）。* 固定溶液：3.5% 多聚甲醛。

1.75g PFA 溶于 20 ml d.H2O 加 5 滴 1M NaOH。在 50-60°C 的热板上搅拌直至溶解。添加 4 滴 IN HCI 并检查 pH 指示剂条。 PH 应为 7.4。用 d.H2O 完成体积至 25ml，并加入 25ml 2xPBS。在添加到盖玻片之前检查 pH 值。

免疫荧光协议 - 甲醇/丙酮固定从 T.C.unit 收集细胞并使用抽吸从培养皿中去除培养基。用 1x PBS 清洗并取出。用冷甲醇：丙酮 1：1 冰上固定细胞 10 分钟。准备封闭试剂，这也是抗体的稀释剂。去除固定剂并在室温下用 1x PBS 洗涤细胞 3 次，每次 4 分钟/在轨道摇床上洗涤。在室温下用 1% NCS 和 1x PBS 封闭 30 分钟。准备一抗（50 升/盖玻片）和潮湿的染色室。在室温下用 1 x PBS 清洗细胞 2 次，然后风干约 7 分钟。在染色室的黑暗中，在室温下与一抗孵育 1 小时。在 t 期间他的时间准备二抗。用 1x PBS 洗涤细胞 5 次（更换 5 次烧杯/每个烧杯计数 5 次）在染色室的黑暗中，在室温下用二抗孵育 1 小时。用 1x PBS 洗涤细胞 5 次。在 Dapi 中安装。

溶液（在染色当天新鲜制备）

* 1x 磷酸盐缓冲盐水。*封闭剂：1% NCS 溶于 1x PBS（使用新鲜的 10x PBS） .* 固定溶液：甲醇：丙酮 1:1 冰冷。Western Blotting Protocol 将凝胶转移到 PDVF 或硝酸纤维素膜上 将膜放入塑料托盘中，在封闭缓冲液中搅拌一小时 在洗涤缓冲液中冲洗 在洗涤缓冲液和一抗中孵育一小时小时 用洗涤缓冲液洗涤 6 X 5 分钟 在洗涤缓冲液加二抗中孵育一小时 用洗涤缓冲液洗涤 6 X 5 分钟 检测（例如 ECL，Amersham 根据制造商的说明）洗涤缓冲液

PBS + 0.1% Tween 20Blocking buffer

Wash buffer + 5%奶粉

所用抗体的浓度取决于每种抗体、抗原的量和使用的检测方法。一般稀释度在几百倍到几千倍稀释之间，但通常要凭经验确定。

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