货号：	MEMCL-010
数量：	100万
规格：	1ml/T25

小鼠胚胎细胞(NIH/3T3)货号：MEMCL-010 细胞介绍与原始的随机交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法一样，NIH/3T3，是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制的连续细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了五轮以上亚克隆。这株细胞对DNA转化及转染研究十分有用。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 细胞特性1） 来源：胚胎2） 形态：成纤维细胞3） 含量：>1x106 个/mL4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5） 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装 运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 细胞用途：仅供科研使用。                       细胞培养步骤一．培养基及培养冻存条件准备：1） 准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，85%；小牛血清，15%。2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。二． 细胞处理：1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。 注意事项： 1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。赛百慷（上海）生物技术股份有限公司主要产品和技术服务：一、原代细胞服务       各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源；       多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源；       原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等；       原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务；二、细胞株/系服务       细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书；       细胞系培养过程的技术指导；       细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等；三、iPS细胞       iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层在）；       iPS细胞增殖及冷冻保存；       iPS基础培养技术实习；       新药及实验仪器上市前评估；四、技术外包服务：各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等五、其他：根据客户需要定制服务等欢迎垂询！订购热线：400-021-2021  赛百慷（上海）生物技术股份有限公司      地址：上海市松江区漕河泾高科技园区莘砖公路518弄21号2楼                上海市徐汇区聚科生物园区银都路466号3号楼2楼      电话：400-021-2021  021-61522780      网址：www.icellbioscience.com 温馨提示：不可用于临床治疗。

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