货号：	MGCL-004
生长状态：	良好
物种来源：	小鼠
组织来源：	卵巢，子宫，前列腺
数量：	100万
规格：	1ml/T25

                           正常小鼠睾丸Leydig细胞(TM4)货号：MGCL-004 细胞介绍该细胞在FSH的作用下cAMP产量增加，但对LH无反应；与原代Sertoli细胞相比，该细胞对FSH的反应性降低。据报道，该细胞组成性纤溶酶原激活物的产量很低，但可被FSH刺激产生，受维甲酸刺激可有大幅增高。该细胞可产生视黄醇结合蛋白、组织纤溶酶原激活物和转铁蛋白；表达FSH受体、雄激素受体和孕激素受体，鼠痘病毒阴性。 细胞特性1） 来源：正常小鼠睾丸癌2） 形态：上皮细胞样3） 含量：>1x106 个/mL4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5） 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装 运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 细胞用途：仅供科研使用。                       细胞培养步骤一．培养基及培养冻存条件准备：1） 准备D-MEM/F-12培养基(  DMEM/F12(1：1)(GIBCO, 12400024)：Ham’s F12/DME Medium(DME-H/F-12 50%Mixture w/o HEEPS,with NEAA Medium（GIBCO,11140-050）)  5%HS + 2.5%FBS。2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。二． 细胞处理：1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。 注意事项： 1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 赛百慷（上海）生物技术股份有限公司主要产品和服务介绍：        一、原代细胞服务：               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务        二、细胞系服务：               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书               细胞系培养过程的技术指导               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等        三、iPS细胞服务：               iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层）               iPS细胞增殖及冷冻保存               iPS基础培养技术实习               新药及实验仪器上市前评估        四、其他技术外包服务、客户定制服务等赛百慷（上海）生物技术股份有限公司地址: 上海市松江区漕河泾高科技园莘砖公路518弄21号2楼      上海市徐汇区聚科生物园区银都路466号3号楼2楼电话:  400-021-2021  021-61522780www.icellbioscience.com

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