GelRed™/GelGreen™常见问题-Biotium|biotium荧光试剂|GelRed|CF染料|biotium-Biotium 中国区总代理-上海开放生物科技有限公司

作者: 时间:2024-09-20 点击量:

GelRed™/GelGreen™常见问题

1、Marker分辨率低的主要原因?

Marker的加样量:marker有一个推荐浓度范围,选择最高的,样品与Marker含量差别大,也会造成条带错误(这不会是染料的问题,用EB也会存在该问题)。正确的DNA上样量是条带清晰的保证。Marker应该选择在目标片段大小附近的梯带较密的,这样比对才准确。另外注意的是,Marker的电泳条件也要符合DNA电泳的操作标准:如果选择λDNA/EcoR I的酶切marker,需要预先65℃加热5min,冰上冷却后使用。从而避免HindⅢ或EcoR I酶切造成的粘性接头导致的片段连接不规则或条带信号弱等现象。

凝胶不平整:梳子不干净有污染,加样孔不平整也会影响图的效果;

电泳条件:电压不稳,电泳时间不超过1h。电压过高,会导致小片段跑出胶,出现条带缺失现象。

缓冲液:TBE的缓冲能力更强,如果缓冲液缓冲性能下降,会导致DNA电泳条带模糊,不规则迁移等。TAE建议换成TBE效果更好。另外建议配胶时的缓冲液和电泳缓冲液是同时配制。

染色剂:GelRed(312nm激发UV成像)无毒,性价比高,灵敏度比传统EB高10倍以上,注意观察凝胶时应根据染料不同,使用合适的光源和激发波长,如果激发波长不对,条带出现模糊等情况。

2、GelRed / GelGreen安全性如何?

GelRed/ GelGreen经过埃姆斯AMS和相关测试,已经被证明是替代EB和SYBR染料更为安全的产品。不过,请使用这些试剂时,也要遵循实验室安全条例等。

3、GelRed / GelGreen的结合机制是什么?

GelRed/ GelGreen作用原理通过静电及电荷相互作用的结合。

4、GelRed / GelGreen检测下限是什么?GelRed/ GelGreen是超敏感的染料。有些用户反馈可以检测含量<0.1ng的DNA。然而,染色的灵敏度取决于仪器的性能和曝光设置等。

5、为什么有GelRed和GelGreen两种溶剂(二甲基亚砜DMSO和水)?在DMSO和水中的染料是否存在差异?

水溶解的产品与储存在DMSO中的产品比较,是一个全新的改良。由于DMSO会被皮肤吸收,我们建议染料溶于水,以避免处理二甲基亚砜存在的潜在危害。鉴于有些用户不希望改变实验方案,我们将继续提供储存在DMSO的染料。经过内部测试,两种溶剂方案的效果相似。

6、可以重新融化GelRed / GelGreen凝胶,再制备吗?

是的,但最好再添加一些染料,保证重新制备凝胶的信号强度。

7、可以提前制作GelRed / GelGreen凝胶,储存供以后使用吗?GelRed和GelGreen染料是稳定的。在保证琼脂糖凝胶的完整性不会被破坏的前提下,你可以将预制的GelRed / GelGreen凝胶储存供以后使用。我们建议在4℃避光贮存凝胶。

8、用那些仪器检测GelRed和GelGreen?GelRed完美兼容标准(302或312nm)紫外透射成像仪。GelGreen的吸光度在250-300 nm和吸收峰在500纳米左右。GelGreen兼容254 nm的紫外透射或可见光激发的凝胶成像仪,如Dark Reader或488 nm凝胶激光扫描仪。

9、GelRed和GelGreen可以用来染色单链DNA或RNA吗?GelRed和GelGreen可用于单链DNA和RNA的染色,但GelRed染单链核酸效果比GelGreen敏感5倍左右。使用荧光酶标仪的滴定实验表明,GelRed绑定单链DNA和RNA荧光信号约是结合双链DNA的一半左右。

点击次数:更新时间:2015-10-26 12:26:41【打印此页】【关闭】 上一条:CF™ Dyes常见问题下一条:没有了

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Biotium 中国区总代理-上海开放生物科技有限公司,专利产品和技术:CF染料新一代荧光标记染料,EvaGreen高分辨率溶解曲线饱和染料,NucView双功能荧光凋亡检测Caspase3/7,Cheetah热启动酶用于多重PCR技术和SNP检测、突变扫描等,AllGlo探针合成染料(替代Taqman技术),细胞凋亡、活性检测试剂盒。DNA定量试剂盒、蛋白定量试剂盒、核酸安全无毒灵敏染料GelRed、蛋白快速染色、神经、离子指示探针等等。

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