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商品描述
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제품특징
□ 농도 5 U/㎕
□ 형상
| 20 mM | Tris-HCl (pH7.5) |
| 0.5 mM | EDTA |
| 5 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 50% | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 첨부 Buffer 조성 (10 × )
| 670 mM | Glycine-KOH (pH9.5) |
| 100 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 67 mM | MgCl2 |
□ 기원
Escherichia coli JM109 carrying plasmids encoding the gene for E.coli exonuclease I.
□ 제품설명
본 효소는 DNA의 phosphodiester 결합의 가수분해를 촉매하므로써 단일가닥 DNA의 3’-OH 말단으로 부터 5’-mononucleotide를 유리시키는 3’→5’exonuclease이다. 본 효소는 단일가닥DNA에 대한 특이성이 극히 높고 이중 가닥 DNA나 RNA는 분해하지 않는다. 본 효소는 80℃, 15분간 열처리하여 실활시킬 수 있다.
□ 활성의 정의
열변성 송아지 흉선 DNA를 기질로 37℃, pH9.5에서 30분 동안 반응하여 10 nmol의 산가용성 물질을 생성하는 효소활성을 1 U로 한다.
□ 활성 측정용 반응액 조성
| 67 mM | Glycine-KOH (pH9.5) |
| 10 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 6.7 mM | MgCl2 |
| 0.25 mg/ml | 열변성 송아지 흉선 DNA |
□ 사용상의 주의
- 25 U의 본 효소와 1 ㎍의 λ-Hind III DNA를 37℃, pH7.5에서 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.- 25 U의 본 효소와 1㎍의 supercoiled pBR322 (RF I)를 37℃, pH7.5에서 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에
변화가 없다.- 25 U의 본 효소와 1㎍의 단일가닥 M13 mp18 DNA를 37℃, pH7.5에서 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에
변화가 없다.- 25 U의 본 효소와 1㎍의 16S, 23S rRNA 를 37℃, pH7.5에서 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
□ 용도
- 반응액에서 단일가닥 DNA의 제거- PCR 반응 후 잔존 프라이머의 분해
