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| 선택 | Cat.No. | 제품명 | 가격(VAT별도) | 수량 |
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제품특징
□ 농도 5 U/㎕
□ 형상
| 20 mM | Tris-HCl, pH7.5 (4℃) |
| 50 mM | NaCl |
| 0.1 mM | CaCl2 |
| 50 ％ | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 첨부 Buffer 조성 (10×DNase I 버퍼)
| 400 mM | Tris-HCl, pH7.5 |
| 80 mM | MgCl2 |
| 50 mM | DTT |
□ 제품설명
Recombinant DNase I (RNase-free)은 소 췌장유래의 DNase I 유전자를 발현·정제한 재조합 단백질로 ss, ds DNA를 효율로 무작위 분해하여 5’-P 말단을 갖는 oligonucleotide를 생성하는 endodeoxyribonuclease이다. Mg2+ 존재 하에서는 ds DNA에 무작위적으로 nick을 만들지만, Mn2+ 존재하에서는 두가닥을 동시에 절단하여 DNA를 단편화한다.본 효소는 사용상 문제가 되지 않는 수준까지 Protease 및 RNase를 제거하고 있기 때문에, 중성영역에서의 안정성이 향상되어 RNA 조제시 안전하게 이용할 수 있다.
□ 기원
소 췌장 DNaseI유전자를 비동물성 숙주에서 발현시킴
□ 활성의 정의
송아지 흉선 (흉골 뒤쪽에 있는 내분비선) DNA를 기질로 25℃, pH 5.0에서 반응액의 260 nm 흡광도를 1 분에 0.001증가시키는 효소활성을 1 U으로 한다(Kunitz unit)..
□ 활성측정용 반응 액조성
| 100 mM | Sodium acetate, pH5.0 (25℃) |
| 5 mM | MgSO4 |
| 40 ㎍/㎖ | 기질 DNA |
□ 순도
10 U의 본 효소와 1 ㎍의 16S, 23S rRNA를 37℃, pH 7.5에서 4시간 반응하여도 RNA 전기영동상 패턴 변화가 없다.
□ 용도
RT-PCR전 genome DNA 제거에 사용.DNA Polymerase I (TaKaRa Code 2130)과 함께 nick translation에 사용.Mn2+ 존재 하에서 shot gun sequencing을 위한 DNA library 제작에 사용.DNA-단백질의 상호작용을 조사하는 footprint법에 사용.T7 혹은 SP6 RNA Polymerase를 이용해 in vitro transcription에 의한 RNA합성 후, 버퍼교환하지 않고 주형DNA를 분해하는데 사용.
