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제품특징
□ 농도 40 U/㎕
□ 형상
20 mM | HEPES-KOH (pH7.5) |
50 mM | KCl |
5 mM | DTT |
50 % | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 제품설명
본 효소는 돼지 간장에서 고정화 RNase A 컬럼을 이용하여 affinity 정제한 것이다.
RNaseA와 1:1 복합체를 형성하여 ribonuclease 작용에 대하여 높은 비길항 저해 (Porcine Liver 유래: Ki=4×10-10 M)를 나타낸다. 그러나 이 반응은 가역적이므로, Urea 또는 sulfhydryl 시약에 의해 복합체를 해리시킴으로써 ribonuclease 활성이 되살아난다. 이 경우 inhibitor는 비가역적으로 실활되며, 종래의 길항성 저해제(nucleotide류, 무기 인산류)와는 달리 단백질이므로 반응계로부터 페놀처리로 간단히 제거할 수 있다. 한편 RNase H 활성은 저해하지 않는다.
□ 활성의 정의
5 ng의 RNase A의 활성을 50% 저해하는 활성을 1 U으로 한다
(RNase A 활성은 cyclic 2’, 3’- CMP로부터 생성하는 3’- CMP를 정량).
□ 사용상의 주의
효소활성은 넓은 pH영역에서 나타나며 pH7~8에서 최대에 이른다.
□ 용도
- cDNA 합성반응 (Ribonuclease inhibitor 0.5 U/㎕ reaction)- Polysome isolation (Ribonuclease inhibitor 1,000 U/ml reaction)- In vitro translation (Ribonuclease inhibitor 1 U/㎕ reaction)- In vitro transcription with cell-free extract(Ribonuclease inhibitor 20 U/㎕ reaction)- In vitro transcription with SP6 or T7 RNA polymerase(Ribonuclease inhibitor 1 U/㎕ reaction)