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제품특징
□ 제품설명
PrimeSTAR HS DNA Polymserase (Code R010A) 등의 α형 DNA polymerase (Pyrobest, Pfu, Vent등 포함)에 의해 증폭된 PCR산물의 대부분은 효소가 가지는 강력한 3"→5" exonuclease활성에 의해 PCR 산물 양 말단이 평활화되어 그대로 TA-cloning에 사용할 수 없다. 따라서 PrimeSTAR 시리즈에 의해 증폭된 PCR 산물을 TA-cloning에 이용하는 경우, 3"말단에 dA를 부가할 필요가 있다.본 제품에는 PrimeSTAR시리즈에 의해 증폭된 산물의 3"말단에 간편하게 dA를 부가하기 위한 A-overhang mixture 및 Mighty TA-cloning Kit가 포함되어 있어 PrimeSTAR 시리즈 (Pfu 계열의 PCR효소 포함)에 의한 증폭 산물 전용의TA-cloning 시약으로 사용할 수 있다.
□ 내용 (20 회)
A. Mighty TA-cloning Kit
| pMD20-T vector (50 ng/μl) | 20 μl |
| Ligation Mighty Mix*1 | 50 μl×2 |
| Positive Control Insert*2 | 10 μl |
B. A-overhang mixture
| A-overhang enzyme | 10 μl |
| 10×Buffer | 20 μl |
| dATP | 10 μl |
*1 Ligation Mighty Mix는 DNA Ligation Kit <Mighty Mix> (TaKaRa Code 6023)과 같은 것임.*2 3’ 말단에 dA overhang을 가지는 약 200 bp의 DNA fragment (E. coli genome을 주형으로 TaKaRa Ex Taq으로 증폭함)
(10 ng/μl)
□ pMD20-T vector의 구조
그림 1. pMD20-T vector의 구조
그림 2. pMD20-T vector의 MCS site


