□ 제품설명
TaKaRa LA PCR Kit Ver.2.1은 LA PCR technology의 효과를 최대한 활용하여 그 위력을 발휘하도록 개발한 새로운 LA PCR Kit이다. LA PCR용으로 최적화한 전용 buffer (LA PCR Buffer II)와 TaKaRa LA Taq 의 조합으로, human genomic DNA를 template으로 긴 단편의 DNA를 증폭하는 등 보다 긴 단편의 PCR을 가능하게 하는 PCR Kit이다. 물론 다양한 template DNA에 응용할 수 있으며 짧은 단편의 DNA 증폭에도 사용할 수 있다. Mg2+ free의 buffer를 첨부하므로써 반응액 조성을 검토할 수 있다.
□ 내용 (50 ㎕ PCR 50 회)
TaKaRa LA Taq (5 U/㎕) | 125 U |
dNTP Mixture (각 2.5 mM) | 400 ㎕ |
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+, plus) (Mg2+ 농도 25 mM) | 250 ㎕ |
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ free) | 250 ㎕ |
MgCl2 (25 mM) | 500 ㎕ |
Control Template (100 ng/㎕ HT29 유래 genome DNA) | 10 ㎕ |
Control Primer LA3 (10 μM) | 10 ㎕ |
Control Primer LA4 (10 μM) | 10 ㎕ |
λ-Hind III digested MW Marker (100 ng/㎕) | 20 ㎕ |
2×GC Buffer I (Mg2+ plus)* (Mg2+ 농도 5 mM) | 1.25 ㎖ |
2×GC Buffer II (Mg2+ plus)* (Mg2+ 농도 5 mM) | 1.25 ㎖ |
Control Primer GC1 (10 μM) | 10 ㎕ |
Control Primer GC2 (10 μM) | 10 ㎕ |
* 증폭영역이 GC-rich 또는 견고한 2차 구조를 취하는 것으로 판단되는 경우, 우선 2×GC Buffer I을 사용한다. Buffer I으로 증폭이 어려운 경우에는 2×GC Buffer II를 사용하는 경우 반응이 개선되는 경우가 있다.
□ 보존 -20℃
□ Control Primer 서열
Control Primer LA3 :5’-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3’Control Primer LA4 :5’-TGCACCTGCTCTGTGATTATGACTATCCCACAGTC-3’* Control Template의 17.5 kb를 증폭한다.Control Primer GC1 :5’-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3’Control Primer GC2 :5’-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3’* Control Template의 GC-rich 영역 1,255 bp를 증폭한다. |