VivanTechnologies的Flex-C克隆试剂盒是一种高效,快速且易于使用的PCR克隆试剂盒。Flex-C酶可以在20分钟内将任何PCR片段直接克隆到任何位置的任何线性化表达载体中。
应用协议很简单。PCR片段可通过PCR聚合酶(例如Taq DNA聚合酶)与引物一起产生,所述引物被设计为在其线性末端与载体具有至少10个同源性碱基。无需对PCR片段进行其他处理(例如限制性酶切,连接,磷酸化或平末端修饰)。线性化的载体可以通过PCR或限制性内切酶(单消化或双消化)产生。通过识别末端的10bp重叠,Flex-C酶可以准确高效地连接PCR片段和线性化载体。
该方法允许在单个反应中将多个片段克隆到单个载体中,而无需亚克隆,以创建融合蛋白,删除和替换DNA序列或插入点突变。Flex-C克隆套件高效,插入率达95%。Flex-C克隆试剂盒还包括Vivantis Taq DNA聚合酶和反应缓冲液以及dNTP,用于随后的PCR克隆筛选。
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