葡聚糖凝胶G-200操作说明书

中文名：葡聚糖凝胶G200

中文别名：交联葡聚糖凝胶 G-200；交联右旋糖酐凝胶 G-200

英文名：Sephadex G-200；Cross-inked dextran gel G-200

供应商：上海远慕

分离范围：5000-600000

干颗粒直径：40～120um

分子量分级范围：A.肽及球形蛋白质：5000～800000；B. 葡聚糖（线性分子）：1000～200000

床体积毫升/克干分子筛：30～40ml/g

得水值：20.0±2.0

溶胀zui少平衡时间（h）：室温72h（20℃）；沸水浴5h（90℃）

柱头压力（kpa）(2.5cm直径柱)：0.39～1.57

PH：2～13

性状：白色珠粒，属亲水性凝胶。性稳定，不溶于水、弱酸和碱溶液，遇强酸能使糖苷键分解。

用途：用于凝胶过滤，肽类分离、脱盐，分子量测定。

保存：RT

适用范围：本产品仅供科研使用！

葡聚糖凝胶G-200简介：

葡聚糖凝胶G-200,白色珠状颗粒。一种由葡聚糖经醚键相互交联合成具有多孔性三度空间网状结构的高分子分离材料，为稳定的亲水性凝胶，G-10是表示G类凝胶吸水量的型号。可将G后的数字除以10即为该凝胶每克干重所吸水分的毫升数。能使一定分子量范围的大分子进入凝胶的网状结构内，不溶于水、盐 分离和提纯蛋白质、多糖、酶、核酸、激素、氨基酸、多酞和抗菌素等。薄层色谱支持物。

葡聚糖凝胶G-200操作流程：

1.乙醇浸泡

在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干。

2.无盐水浸泡

室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的完全溶胀。

3.盐酸浸泡

在常温下再用0.1M HCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性。

4.装柱

将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层。

5.平衡

上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）。

6.上样

凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm 以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可。

7.洗脱方法

可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化。

8.清洗

每次用完之后，将柱子里的缓冲液置换为去离子水，然后用20%的乙醇封存。

9.在位清洗（CIP）

凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

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