PEI转染手册
转染操作流程：1、细胞传代：
转染前24h内分离293T细胞至含10％胎牛血清的DMEM培养基中进行传代培养，接种密度如下：6孔板：0.5x106细胞10cm培养皿：4.0x106细胞15cm培养皿：9.0x106细胞
2、转染
转染前将所有试剂置于室温。
2.1质粒DNA的稀释
在无菌试管中，用无血清的DMEMW/O酚红培养基（浓度为10％）稀释质粒DNA（ug）。病毒包装体（psPAX2）：病毒包膜（pMD2G）和重组质粒DNA的稀释比例分别为4:2:1。
6孔板：200ul+3ug的DNA10cm培养皿：1ml+7-8ug的DNA15cm培养皿：2ml+11-12ug的DNA2.2转染复合体形成
将PEI（1ug/uL）加入已稀释的总DNA中，PEI与DNA（ug）的混合比率为3:1。加入后立即涡旋混合。
6孔板：9ulPEI复合体（1ug/ul）=9ug10cm培养皿：21ulPEI复合体（1ug/ul）=21ug15cm培养皿：33ulPEI复合体（1ug/ul）=33ug将添加到细胞的DNA/PEI的混合物在室温下孵育15分钟。
4、收获转染细胞
转染后48小时内收获转染细胞/或病毒上清。试剂的配制：PEI（1ug/ul）polysciences（CAT＃23966-2配制成储液：)1、将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI，冷却到室温。2、调整pH值至7.0，用0.22um的滤器过滤消毒，分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃
polyscience，inc，成立于1961年，起家于化学但超越化学领域的美国制造商，总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿，公司业务主要涵盖三大块：1.实验用产品：a）成千上万种具品牌特色的化合物和试剂，应用于实验室研究，组织学，电镜和解剖病理学以及其他诊断和生命科学研究；b）种类极其宽广的单体和聚合体，满足各方研究领域；c）有机/无机化合物，生物可降解材料，磁珠，荧光素，染料和特定抗体，以及常规蛋白包被颗粒（直径范围40nm~10mm）的全球首要制造工厂；d）顶端多聚化合物的供货中心，满足各种高性能工业领域需求，包括替代能源，汽车电子，国防 航空电子，便携式通信和计算机，医疗器械组装。2.定制合成；3.cgmp生产服务。
Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品，单/多聚体等产品的研发供应，所提供的产品服务于组织学（显微技术）、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。Polysciences公司成立之初的主要产品为电镜样品制备的相关产品，目前该产品线延伸为多种组织学研究产品，包括多种方式与用途的样品包埋、优秀的染料及诊断试剂盒。同时，Polysciences在对物质分离和纯化的努力中逐步发展出超顺磁性微珠，用于DNA、蛋白质、多肽的分离纯化产品，成为生命科学研究中物质分离、新蛋白（多肽）发现及功能研究的有力武器。此外，Polysciences还在高纯度单/多聚体产品领域独树一帜，通过多种技术增强单/多聚体的关键特性，并将其应用于医疗器械的研发与生产，目前Polysciences已将聚合物延伸到电子多聚体领域。公司秉承为应用而研发，目前已拥有超过3000种产品。
Polysciences, Inc. is divided into three broad divisions; Laboratory Products, Custom Synthesis cGMP Manufacturing and Contract Manufacturing Packaging
Laboratory Products / Catalog
This division includes thousands of products useful for histology, microscopy and life sciences applications.
Our catalog presents these products based on application areas
Life Sciences
Monomers Polymers
Microspheres Particles
High Performance Adhesives, Coatings Encapsulants
Custom Synthesis cGMP Manufacturing
Polysciences is equipped and focused on providing custom variations of products and custom designed materials to suit our customer s specialized needs.
The manufacturing facilities at Polysciences include multi-step synthesis, distillation and drying, recrystallization and filtration clean room operations working within FDA/GMP guidelines. Learn More
Contract Manufacturing Formulation
Our collection of small- to mid-scale manufacturing processing and packaging equipment allows us to handle a broad array of package types including a wide variety of glass or plastic bottles, custom containers, tubes, towelettes or flame-sealed ampoules.
We have expertise in manufacturing and filling powdered products and mid-range viscosity materials into tubes. We can make, package, warehouse and ship your scientific or cosmetic product, freeing you to sell your products.
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