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QIAGEN-囊泡exosome RNA的完美解决方案

作者: 时间:2025-01-30 点击量:

\"QIAGEN-囊泡exosome

exosome是直径约为30-150nm的小囊泡,在30年前被人们所发现。exosome天然存在于所有体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,且其蛋白、RNA和脂肪成分特异,早期的研究认为,exosome执行蛋白运输功能,特异靶定受体细胞,交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年,研究人员发现exosome也运输核酸,参与细胞间通讯。至此,这种小囊泡才被人重视,并成为热门的研究对象。细胞外微泡, 运载RNA(包括mRNA、miRNA、lncRNA)、DNA及蛋白质,为细胞间信号交流起着重要作用。


QIAGEN exoRNeasy Serum/Plasma Kit改进了传统的超速离心微泡分离方法,能够在20分钟内快速纯化得到细胞外囊泡。该试剂盒采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技术,通过离心柱和特制缓冲液,从多达4 ml的预过滤血浆中分离exosomes。之后使用QIAGEN miRNeasy技术分离总RNA。整个实验流程,从血清/血浆样本到RNA产物,只需1小时。


性能优势:
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exoRNeasy纯化exosomes和其他细胞外微泡与超速离心法相比,不仅速度更快,并且产物纯度更高。扫描电镜显示,虽然这两种纯化技术都能够纯化预期大小的完整的囊泡,但超速离心法的产物还含有很多不符合预期的更小、或其他形状的细胞结构。


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通过RT-qPCR实验对exoRNeasy纯化的RNA产物和exoEasy分离柱流出液
进行分析,结果显示,exoRNeasy的产物包括血浆中所有mRNA,包括
细胞外囊泡的miRNA,且不含细
胞。

操作流程 :

从细胞外微泡分离RNA的完整实验包括两步:纯化exosomes和分离RNA。

在exosomes纯化步骤,预过滤的血浆(不包含大于0.8 μM的微粒)与Buffer XBP混合,加至exoEasay亲和性膜离心柱上,结合到柱上。使用Buffer XWP洗涤结合在膜上的囊泡,之后使用QIAzol裂解。

在RNA分离步骤,在QIAzol洗脱液中加入氯仿,回收水相,将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上,洗涤三次后洗脱。

产品信息 :囊泡RNA研究完整解决方案:

研究方案产品货号目录价
纯化来自血清/血浆样本中
exosome中的RNA
(含miRNA)
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)7706426420
exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50)7704410560
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)770235790
检测exosome中
miRNA产品套装
miScript II RT Kit (12)2181601450
miScript Primer Assay (100)2183001060
miScript SYBR Green PCR Kit (200)2180735380
miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control219610560
检测exosome中
lncRNA产品套装
RT² First Strand Kit (12)3304012640
RT² lncRNA qPCR Assay (200)3307011590
QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)2080542880
检测exosome中
mRNA产品套装
RT² First Strand Kit (12)3304012640
QuantiTect® Primer Assay (200)249900900
QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)2080542880

规格解释 :

产品名称规格exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)10 次Maxi大抽+ 10 次Midi中抽
(样本囊泡RNA量不确定时,
建议选择尝试确定初始样本)
exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit(50)50次;一次最大抽提1ml血浆/血清exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)50次;一次最大抽提4ml血浆/血清
产品货号
Y5-77023
Y5-77044
Y5-77064

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