Quant-iT RNA定量检测试剂盒在Modulus单管型多功能检测仪上的应用

作者: 时间:2024-11-14 点击量:

  • 应用RiboGreen荧光染料进行RNA精确定量RiboGreen RNA定量试剂是一种超灵敏的核酸荧光染料,使用这种染料可以对溶液中的RNA进行简单快速的定量。常规定量RNA的方法是在260nm处检测溶液的光吸收度,但是这种定量方法灵敏度差(4μg/ml RNA),且易受溶液中寡核苷酸、蛋白、盐离子...
  • GloMax 20/20 单管光度计(TD 20/20n single tube luminometer)

     

    GloMax 20/20 光度计是用于生命科学研究的一款灵敏度高、功能多样的光度计,是为进行生物与化学发光检测而设计的,例如报告基因分析及化学发光分析。触摸屏界面能对仪器进行全面控制及数据收集。

     

    一流的性能

     

    灵敏

    GloMax 20/20光度计对所有的发光分析都非常的灵敏,专有的电路和高级的光子计数光电倍增管(PMT)产生无可匹敌的信噪比,用Promega’s萤光素酶分析试剂可以检测到700个分子的萤光素酶。

    GloMax 20/20 发光检测仪对所有的发光分析都非常的灵敏,特殊的电路设计和先进的光子计数光电倍增管(PMT)提供了无与伦比信噪比。其检测极限可达1×10–21 moles 荧光素酶(700个荧光素酶分子),是目前最灵敏的单管型发光检测仪。

     

     

    线性范围宽

    GloMax20/20光度计方便用户检测弱光或强光样品,不需要稀释样品,GloMax20/20超宽的动力学线性范围减少探测器饱和,可以测定微弱或明亮的生物发光样品。

     

    简单易用

    操作程序设置:

    1.Promega 操作程序已安装到软件中,用户可以迅速地选择操作程序并开始测定。

    2. 存储操作程序 用户可以保存18个操作程序供将来使用。

     

    GloMax20/20 触摸屏界面

     

    1. 简单易用的触摸屏幕界面使20/20n操作更方便。

    2. 用户可以自行更改程序设置,使检测自动化。

     

    主要应用

    报告基因分析

    ATP分析

    细胞毒性分析

    细胞内Ca2+分析

    细胞增值

    核酸定量

    酶分析

     

    技术参数

    灵敏度: 大于700分子的萤光素酶

    线性范围: 8个数量级

    样品适配器: 容纳1.5 mL离心管或35mm细胞培养

    探测器:光电倍增管(PMT)

    光谱响答范围: 350~650 nm

    波峰: 420 nm

    注射器:一个或两个自动注射器(可选择)

    注射体积: 25-300 μL (±3 μL)

     

    目前,其已经全面升级为:Modulus™单管型多功能光度计

    Modulus™是一款单管型荧光、生物与化学发光、光吸收多功能荧光计,作为Turner Biosystems公司畅销产品-TD-20/20、TD-20/20n luminometer的升级产品,其特点是采用模块化设计,可根据实验的需求,采用相应的检测模块,来完成荧光、生物与化学发光和光吸收的多功能检测。

     

    荧光检测功能(Modulus Single Tube Fluorometer)

     

    使用Modulus™可以方便的完成多个波长段荧光的检测,有四种不同激发波长段的高性能光学检测盒可供选择,每一种光学检测盒由一个光源、一个激发光滤光片和一个发射光滤光片组成,通过简单的插拔来实现在Modulus™上的安装,从而完成绝大部分常用荧光染料激发荧光的检测。

    Blue Kit: 用于GFP, PicoGreen®, RiboGreen®, Fluorescein, Quant-iT™ Protein检测

    UV Kit: 用于Hoechst dye, 4-MU检测

    Green Kit: 用于Rhodamine, Cy3, RFP检测

    Red Kit: 用于Cy5, Quant-iT™ RNA检测

     

    生物与化学发光检测功能(Modulus Single Tube Luminometer)

     

    使用发光检测模块可以完成生物与化学发光检测,例如:ATP检测、萤光素酶报告基因检测及其它生物发光与化学发光检测。通过模式切换可以方便的实现荧光检测功能与发光检测功能的转换。

     

    光吸收检测功能(Modulus Single Tube Absorbance Reader)

     

    嵌入式的吸收光检测模块可用于可见光谱吸收光的检测,例如:用Bradford法、Lowry法和BCA进行蛋白质浓度测定。调整滤光片盒,可以选择针对实验的正确波长。

     

    特点:

    1.合盖启动:调整设置可在合盖后立即开始检测

    2.模块切换:只需简单的插拔

    3.灵活的样品室:1.5ml离心管(发光检测)10×10mm比色皿(荧光、光吸收检测)100ul微量比色皿(荧光检测)

    4.触摸屏:导航界面简单、易用,可显示、存储18次校正结果和20个检测数据

    5.多模式选择:荧光检测可进行 1-5点校正;可直接读出样品荧光强度值或浓度值;荧光和发光检测支持动力学分析(数据流)功能,可以完成不同时间间隔的动态测量

     

    主要应用

    1.荧光检测:DNA/RNA定量,GFP报告基因检测,酶分析,蛋白定量

    2.发光检测:萤光素酶报告基因检测,ATP检测,化学发光与免疫检测

    3.光吸收检测:蛋白定量,细菌浊度OD600检测

     

    A.核酸定量检测

     

    使用荧光检测模块,Modulus™能够完成高灵敏度的DNA/RNA定量检测,可应用PicoGreen或Hoechst染料定量检测DNA,应用RiboGreen或Quant-iT RNA染料定量检测RNA。使用PicoGreen染料,在微量检测皿100ul检测体积下,可检测低至4.5pg的dsDNA。

     

    B.蛋白定量检测

     

    Modulus™为蛋白定量检测提供了很大的灵活性,可应用Quant-iT蛋白检测试剂在荧光模块下进行检测;也可用光吸收模块采用Bradford法、Lowry法和BCA法检测。

     

    C.报告基因检测

     

    Modulus™可作为荧光计或生物与化学发光光度计来完成报告基因的检测,应用荧光模块,可检测报告基因GFP(绿色荧光蛋白)与其几个突变体的表达;应用发光检测模块,可完成萤光素酶报告基因的检测。

     

    D.ATP和活性氧(ROS)检测

     

    Modulus™可作为生物与化学发光光度计来完成ATP水平的检测,从而进行细胞活性与毒性分析;利用鲁米诺(Luminol)作为化学发光反应的底物进行活性氧(ROS)水平检测

     

    技术参数

     

    荧光检测模块性能

    灵敏度:6ppt荧光素,4.5pgdsDNA(使用PicoGreen染料)

    线性响达范围: 6 个数量级

    检测器: 光电二极管

    光源:

    Blue LED 465-485nm

    UV LED 365-395nm

    Green LED 495-525nm

    Red LED 620-645nm

    检测样品室: 容纳10×10mm检测皿或100ul微量比色皿(使用微量比色皿适配器)

    读数:直接获得浓度的数值或荧光光强值

    校正:1-5点校正

    不连续读值方式:可读取样品的平均测量值以提高精确度

     

    发光检测模块性能

    灵敏度:1×10-20mol萤光素酶

    线性响达范围: 5 个数量级

    检测器: 光电倍增管(PMT)

    检测样品室: 1.5ml离心管

    光谱响答范围: 350–650 nm

    波峰: 420 nm

     

    光吸收检测模块性能

    光谱范围: 360–1100 nm

    波长选择: 560 nm ,600nm,700nm(其它波长须定制)

    光学测量范围:0.0-4.0A

    光学测量精度:±0.7%

    光学测量精密度:≤0.5% at 1A

    生物与化学发光检测应用  应 用 对应检测方法 荧光素酶报告基因检测 Firefly Luciferase Assay, Renilla Assay, Gaussia Luciferase Assay 双荧光素酶报告基因检测 Dual-Luciferase Reporter Assay, Dual-Glo Reporter Assay Systems 细胞增殖与细胞毒性检测 CellTiter-Glo cell Viability Assay, BacTiter-Glo Microbial Cell Viability Assay 环境卫生ATP检测 ENLITEN ATP Assay Systems, ENLITEN Total ATP Rapid Assay Systems 水环境检测 发光海洋细菌, 淡水青海弧菌 自由基, 活性氧检测 鲁米诺 (Luminol)及其衍生物, 吖啶酯, AMPPD 等发光检测 化学发光免疫分析 HRP, AP标记的发光底物检测 酶活性检测 aCella-AChE 乙酰胆碱酯酶, SEAP (分泌型碱性磷酸酶) 激酶检测 Kinase-Glo Luminescent Kinase Assays, Kinase-Glo Plus Luminescent Kinase 药物的吸收,分布代谢检测 P450-Glo CYP450 Assay Systems, Pgp-Glo Assay Systems, MAO-Glo Assay 细胞凋亡检测 Caspase-Glo 8 Assay Systems, Caspase-Glo 9 Assay Systems Ca2+ 检测 水母发光蛋白检测

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