CRISPR/Cas9系统——是一种灵活、简单的、可以对特定基因组位点进行切割置换的系统,该系统特异性高、细胞毒性低。CRISPR/Cas9系统是利用Cas9核酸酶在向导RNA的指引下通过识别基因组的任何位点保守的间隔相邻基序(PAM,序列为NGG),在PAM的上游对DNA进行定点切割。
使用pCas-Guide系统可以很简便的为内源性基因标记标签。除此之外,pCas-Guide系统的供体载体(rescue donor vectors)也可以用于其他的基因组工程,如基因抑制(突变,缺失,插入),用于启动子研究的荧光素酶报告基因置换或绿色荧光蛋白基因置换,基因敲入以及用于治疗的基因修复等。
Cas9 Further Reading
- Genome editing of human pluripotent stem cells to generatehuman cellular disease models. Dis Model Mech. 2013 Jun 10
- Biotechnology: Rewriting a genome. Nature 2013 Mar 7;495(7439):50-1
- RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9. Science 2013 Feb 15;339(6121):823-6
- Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems. Science 2013 Feb 15;339(6121):819-23
有关供体载体的详细信息请链接http://www.blueheronbio.com/Services/Genome-Editing.aspx。
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