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Mutagenizing a yeast gene with a mini-transposon

作者: 时间:2024-09-20 点击量:

Mutagenizingayeastgenewithamini-transposon

First,clonegeneintovectorpHSS6.Then:

  • Day1:Transformplasmidintobacteriaexpressingtransposase.
  • Day2:MatetransformantstobacteriacarryingmTn(Matingmeansmixingthecellsandplatingwithselection).
  • Day3:Scrapeoffcellsandmatetobacteriacarryingresolvase.
  • Day4:Scrapeoffcells,makeaminiprepandtransformintoE.coli.
  • Day5:Scrapeofftransformants,makeaminiprep,cutwithNotI.
  • Day6:Transformdigestintoyeast.
  • It\"sjustthatsimple.

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