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蚂蚁淘在线 / 品牌中心 / Plant media品牌新闻

ORGANOTYPIC LIMB CULTURES

作者： 时间：2024-12-25 点击量：

ORGANOTYPICLIMBCULTURES

  • -embryosaredissectedfromtimed-pregnantmicefrom10.5-11.5d.p.c.
  • -limbbudsaremicrodissectedandplacedinholdingmedium(L15mediumsupplementedwith1xMITO+serumextender)(allmediaissupplementedwith100Upenicillin/mland0.1mgstreptomycin/ml)
  • -limbsareallowedtositinholdingmediumanywherefrom20minto2hours
  • -0.2mlofserum-freeexplantmedia(DMEM-F12mediumsupplementedwith5xMITO+withorwithout10%fetalbovineserum)isaddedtoeachwellofasix-welltissuecultureplatecontainingCyclopore(polyethyleneterphthalate;FalconLabware)inserts
  • -limbsaretransferredfromtheholdingmediaontothesurfaceoftheCycloporemembranes(fortransfer,theendofa200祃Pipettetipisremovedwithasterilerazorblade(toenlargethehole),andlimbsaretakenupin5–10祃ofholdingmedia)
  • -limbsaregrownonthetissuecultureinsertsina37oCincubatorunderanatmosphereof5%CO2
  • -explantmediaisreplacedevery48hours

    • Limbscanbesuccessfullygrownfor3–4days

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