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Gentarget体内融合,Eco™PCR克隆构建哺乳动物或大肠杆菌表达载体的最简单方法。 介绍克隆通常受到成本,劳动强度和限制酶位点不相容性的限制。传统的体外克隆需要多种末端连接酶(例如T4连接酶,拓扑异构酶,平末端连接酶)或特定的链交换重组酶(例如CRE,loxP,Gateway BP,LR重组酶)。产生突出的末端或平末端需要通过限制酶消化或末端抛光来制备载体,或购买特定的载体和重组酶。什么是Eco PCR克隆方法?GenTarget的Eco TM PCR克隆试剂盒中的工程大肠杆菌菌株具有增强的同源重组功能,可以进行 体内 连接反应,而无需进行管反应。 GenTarget为 大肠杆菌克隆细胞提供了一系列用于哺乳动物或大肠杆菌表达系统的内置载体。带有内置载体的可立即使用的大肠杆菌细胞的专有工艺可确保低背景和超过90%的阳性克隆率。 革命性的Eco Fusion 体内 PCR 是具有以下功能的最简单的PCR克隆方法进阶产品功能:只需使用与表达载体同源的短臂侧翼的引物对,即可扩增您感兴趣的基因将1µl纯化的PCR加到工程化的随时可用的克隆细胞中立即进行改造。 您无需购买表达载体。 优化表达的大肠杆菌或哺乳动物表达载体已经内置在克隆细胞中。您只需选择带有满足您需求的内置载体的克隆细胞即可。对于大肠杆菌表达,已验证的阳性 克隆可直接用于基于T7或非基于T7的蛋白质表达,具体取决于内置载体, 从而消除了向表达菌株(如BL21)的第二次转化。[ 注意:如果您的靶标有剧毒,将其直接克隆到表达菌株中可能会造成困难。对于此类情况,请使用我们的自控PCR克隆细胞(货号:IC-1003) ]简便的Eco PCR克隆方法消除了其他克隆方法的劳动强度大,有时麻烦的载体制备过程。不需要任何体外试管反应,例如连接,拓扑连接或输注反应。让 E Coli 在体内为您完成这项工作…并直接在表达菌株中完成!GenTarget提供了一系列带有不同内置载体的Eco克隆试剂盒。请检查我们的产品线(Eco PCR Cloning Kits)以了解详细信息。
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