生物发光检测

bioluminescence

★荧光素酶（Luciferase）对基因、细胞和活体动物进行标记；

★荧光素酶催化底物（例如荧光素钾盐）反应后，会产生化学发光。这种光是由化学反应而来，不需要激发光；

★标记方法是通过克隆技术，将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内，通过对克隆细胞进行筛选，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。

★特异性强，无自发荧光；

★高灵敏度，在体内可检测到几百个细胞，检测的深度在3-100px；

★定量精确

★信号较弱，检测时间较长；★仪器精密度要求较高；

★细胞或基因需要转基因标记；

★不可用于人体，不适用于抗体、多肽等标记

荧光检测

fluorescence

★采用荧光报告基因 (GFP、RFP等) 或荧光染料进行标记；

★需要外接激发光源，利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光，就可以形成体内的生物光源。

★荧光染料、蛋白标记能力强；

★信号强，成像速度快，操作简便，实验成本较低；

★未来可用于人；

★适用范围广，可以是动物、细胞、微生物，也可以是抗体、药物、纳米材料等。

★存在自发荧光，影响灵敏度；

★光容易被动物组织吸收；

★检测深度受限；

★背景光干扰，定量准确度低