ProImmune公司成立于2000年,总部位于英国牛津,在免疫学功能检测多聚体产品和服务领域,是全球无可争议的领导者。其产品主要包括MHC Class I 五聚体和MHC Class II四聚体,用于特异性T细胞检测。广泛用于肿瘤、传染性疾病、病毒、自身免疫性疾病和移植等热门领域的基础、疫苗和临床研究。
ProImmune拥有市场上最全面的商品化I类MHC多聚体复合物。针对包括如Influenza、CMV、HBV、HCV、HIV、EBV、SARS-CoV-2、Cancer等研究领域的五聚体,共超过200种。同时提供五聚体定制服务、抗原表位发现服务等。
图例:五聚体结构
产品线:
1. MHC Class I五聚体
2. MHC Class II四聚体
3. CD1d四聚体
4. MR1四聚体
5. MHC Class II单体
6. MHC Class I单体
7. ProMix™ 混合肽
产品用途:
1. 用于检测抗原特异性CD8/CD4T细胞
2. 提供抗原表位发现服务(REVEAL Binding Assay)
3. 疫苗的免疫检测及评价
4. 免疫治疗及效果评估
五聚体列表(部分)
应用领域 | 等位基因 | 多肽编号 | 多肽序列 | 表位来源 |
Cancer | A*01:01 | 29 | EADPTGHSY | MAGE-A1 161-169 |
COVID-19 / SARS-CoV-2 | A*02:01 | 4323 | LITGRLQSL | SARS-CoV S-protein (996-1004) (confirmed epitope) |
COVID-19 / SARS-CoV-2 | A*02:01 | 4339 | YLQPRTFLL | SARS-Cov-2 S-protein 269-277 (confirmed epitope) |
HBV | A*02:01 | 23 | FLPSDFFPSV | HBV core antigen 18-27 |
HIV/SIV | A*02:01 | 84 | ILKEPVHGV | HIV-1 RT 476-484 |
Influenza | B*07:02 | 1743 | QPEWFRNVL | Influenza A PB1 329-337 |
四聚体列表(部分)
应用领域 | 等位基因 | 多肽编号 | 多肽序列 | 表位来源 |
Cancer | DRB1*01:01 | 2894A | KVPIKWMALESILRRRF | HER2 883-899 |
COVID-19 / SARS-CoV-2 | DRB1*01:01 | 4329 | GAALQIPFAMQMAYRF | SARS-CoV S protein (873-888) (conserved in SARS-CoV-2) |
COVID-19 / SARS-CoV-2 | DRB1*01:01 | 4330 | MAYRFNGIGVTQNVLY | SARS-CoV S protein (884-899) (conserved in SARS-CoV-2) |
HIV | DRB1*01:01 | 2741 | DYVDRFYKTLRAE | HIV-1 gag 295-307 |
Influenza | DRB1*04:01 | 2729 | GFVFTLTVPSER | Influenza A MP 61-72 |
Allergy | DRB1*01:01 | 3147 | KCIEWEKAQHGA | Mugwort pollen Art v 1 25-36 |
Autoimmunity | DRB1*04:01 | 3133 | ATIKAEFV[cit]AETPYM | Cit CILP 297?311 |
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ProImmune的PRO5 ® MHC I类五聚体最一致,发布最多的广告检测抗原特异性CD8 + T细胞的技术 Pro5®MHC五聚体。Pro5®MHC五聚体的优美合理设计在其五聚体卷曲螺旋核芯一端的一个平面中呈现五个MHC肽复合物,在该磁芯另一端的第二个平面中呈现五个检测标签。Pro5®Pentamers功能均匀明亮的染色灵活的标签选项出色的长期稳定性1800多种科学出版物比MHC四聚体更好的均匀亲合力广泛的疾病领域和目录项目为您所需的肽量身定制ProImmune经验丰富的免疫学团队提供应用支持已发布的Pro5®五聚体染色数据示例:由包括牛津大学和ProImmune在内的中国和英国的国际团队合作发表的论文,对正在康复的患者的SARS-CoV-2特异性T细胞应答进行了定性和表征:彭勇,董天,等。(2020)。“英国SARS-CoV-2康复期患者中SARS-CoV-2诱导的宽而强记忆CD4 +和CD8 + T细胞”https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.06.05.134551v1.full图1.记忆表型-HLA-B * 40:01限制性NP322-331(MEVTPSGTWL)特异性T细胞的分化和分化状态。分离PBMC并用NP / B * 40:01五聚体复合物和T细胞分化标记物染色,并使用流式细胞仪进行分析。A)CCR7和CD45RA的分化标志物在CD8 +五聚体+ T细胞上的表达。B):在CD8 +五聚体+ T细胞上CD27和CD28的分化标志物的表达。在这篇简短的短片中,陶东教授(牛津大学免疫学教授)描述了她在SARS-CoV-2患者的抗原特异性记忆T细胞反应中的最新工作,着重介绍了她所在小组最近发表的《自然免疫学》出版物及其用途。 PRO5的® MHC五聚体在他们的工作:有关完整的谈话,请访问:https : //youtu.be/AG4RaIoARC0如果您对Tao Dong教授的工作感兴趣并想了解更多信息,请访问我们的Tao链接,了解她在T细胞免疫学方面的职业以及最近对SARS-CoV-2的研究:https : //youtu.be/wHIjQn6wwUoFerdosi SR等。等 (2019)。“具有工程免疫沉默的人类T细胞表位的多功能CRISPR-Cas9”Nature Communications 10,商品号1842图2.锚残基突变后,Pro5®Pentamer特异性SpCas9免疫显性表位特异性CD8 + T细胞识别被取消。使用β特异性Pro5®Pentamer在受肽β脉冲抗原呈递细胞刺激的PBMC中检测到表位β特异性CD8 + T细胞反应。b当健康的供体B细胞APC用突变的肽β2脉冲时,CD8 +Pro5®Pentamerβ+ T细胞的百分比降低至0.3%。表:锚定(第2和/或第9)残基突变前后的表位α和β的位置,序列和IEDB HLA结合百分数等级。Sb,归一化结合分数;Si,标准化的免疫原性评分。Webb J.等。等 (2010)。“在高度浆液性卵巢癌中表达上皮内淋巴细胞标志物CD103(αE/β7整联蛋白)的CD8 + T细胞明显升高。”妇科肿瘤学,2010年,第118卷,第3期,第228–236页图3.特异性针对肿瘤抗原NY-ESO-1的CD8 + T细胞主要为CD103 +。对HLA-A2 + EOC患者(IROC013)的恶性腹水产生的T细胞进行流式细胞术分析,该患者表现出对NY-ESO-1的HLA-A2限制性表位的反应性。分析显示,用A * 02:01 / SLLMWITQV(NY-ESO-1157–165)Pro5®Pentamer呈阳性染色的CD8 +淋巴细胞的频率。进一步鉴定五聚体阳性CD8 + T细胞的CD103表达(右图)。所有事件首先通过前向和侧向散射确定总淋巴细胞总数。Pro5®Pentamers:针对最苛刻应用的设计一致性当您尝试检测罕见的抗原特异性T细胞种群时,您将了解拥有灵敏,准确且可再现结果的研究工具的重要性。Pro5®MHC I类五聚体就是为这些目的而设计的。它们直接结合特定特异性的T细胞受体,后者由主要组织相容性复合物(MHC)等位基因和肽组合确定。Pro5®Pentamers可用于检测和分离罕见于0.02%淋巴细胞的抗原特异性CD8 + T细胞群体。它们还适用于详细的表位表征和进一步的免疫监测。与其他来源的MHC多聚体可能具有可变的质量和稳定性不同,Pro5®Pentamers得益于卓越的设计并按照专业标准制造。每个五聚体经过四次严格的质量控制步骤后均需纯化四次。使用Pentamer技术可使您获得准确且可重复的结果。重点出版物Pro5®Pentamers用于研究中,显示HIV上调检查点抑制作用,导致TGIT标记的T细胞衰竭图4. TIGIT在CD8 +末端效应T细胞和HIV特异性CD8 + T细胞上与各种Pro5®MHC I类五聚体共染色的表达。Chew GM等。(2016) “ TIGIT标记出疲惫的T细胞,与疾病进展相关,并作为HIV和SIV感染的免疫修复的目标。” PLoS Pathog 12(1):e1005349。doi:10.1371 / journal.ppat.1005349赞扬Pro5®Pentamers来自卡斯·博拉德博士美国德克萨斯州休斯敦贝勒医学院“Pro5®MHC Pentamers在我们针对移植后癌症和病毒感染的过继免疫疗法的研究中发挥了重要作用。我们使用五聚体来检测和量化在临床上使用的CTL系中抗原特异性T细胞的数量。我们还使用它们来检测移植患者的CTL输注前后的外周血中的抗原特异性CTL。选择五聚体是因为其稳定性以及与MHC四聚体相比阳性人群的强度和特异性增加。我们发现Pentamers是一致和可靠的,并且ProImmune的客户服务非常出色。”Pro5®五聚体标签选项用R-PE,APC或生物素Pentamer Fluorotag预先标记。选择此选项可随时为您的应用添加Pentamer。未标记,用于用R-PE,APC或生物素Pentamer Fluorotag标记。选择此选项可长期存储未标记的五聚体,需要较大批量鉴定的项目,随时间推移更改标签或用五聚体池染色。生物素标记的五聚体允许不受约束地进行二次染色,例如选择的荧光染料-缀合链霉亲和素,以解决任何颜色或质量细胞计数通道。荧光染料标记的或生物素标记的五聚体易于用于珠子分离和随后的抗原特异性CD8 + T细胞培养。详细标签选择直接标记的五聚体储存在4°C,使用方便快捷。它们在分析单个供体样品的多种肽特异性中特别有价值。单个供体样品可以同时染色,并通过标记的五聚体进行两次或三次染色来分析多种特异性。这样可以生成更完整的免疫反应图谱,同时减少染色所需的细胞总数。R-PE标记的,APC标记的和生物素标记的五聚体的任何组合均可用于此目的。未标记的五聚体可在-80°C下保存,并在此条件下可保证12个月,非常适合长期使用。学期研究。在研究开始时对大量Pentamer进行内部验证,因为不必每隔几个月重新验证新试剂的批数,从而节省了时间。未标记的五聚体为用户提供了额外的染色灵活性,因为同一复合物可与多种不同的荧光染料一起使用。此功能使实验设计更具适应性,尤其是在选择仅以某些颜色提供的针对细胞表面标记或细胞内蛋白质的抗体时。Pro5®MHC I类五聚体的优势Pro5®MHC五聚体MHC四聚体亲和力和配置每个五聚体在相同方向上有5种MHC肽复合物,可增强与T细胞受体(TCR)的亲和力相互作用保持四面体构型的MHC肽复合物通常仅允许3个MHC肽复合物与TCR结合亮度独特的标记技术可将多达5个荧光标记粘贴到每个Pentamer上,产生更明亮的信号从本质上讲,四聚体将在复合体的中心具有一个荧光标记贴标灵活性生物素标记的五聚体和未标记的五聚体(可以用所选的荧光染料标记)最大程度地扩大了可能的应用范围必须通过预先标记将生物素化的MHC单体与荧光标记的链霉亲和素多聚而成的四聚体稳定性未标记的五聚体可以在-80°C下长期保存,然后在需要时使用掺有荧光染料的四聚体必须在4°C下保存,从而降低其保存期限图5.外周血(PBMC)样品的MHC多聚体染色与CD8 FITC的关系。用Pro5®Pentamer或MHC四聚体对1x 105个对所示每种抗原具有特异性的PBMC进行染色。该图显示了活细胞,并证明了当用五聚体与四聚体对细胞进行染色时,其敏感性和平均荧光强度的增加。Pro5®MHC I类五聚体和相关产品的更多详细信息Pro5®Pentamer产品尺寸选项Pro5®Pentamer提供50、150和500个测试量。请查询较大的批次。标记和未标记的Pro5®Pentamer的染色方案在Pro5®MHC Pentamer手册和“协议” 页面中可以找到有关Pro5®Pentamer的全面染色规程 。下载Pentamer手册Pro5®MHC I类五聚体的其他产品选择Pro5®MHC I类五聚体和抗CD8试剂盒Pro5®Pentamer分析应与CD8 + T细胞群体共同染色进行。所有Pentamer都可以在带有FITC标记的抗CD8单克隆抗体(人类或小鼠)的试剂盒中提供。试剂盒中提供的抗体克隆已与Pentamer产品一起测试了优异的性能,并作为单独的等分试样提供。这使用户能够滴定抗体以找到最佳的工作稀释度。我们的目录中有250多种不同的Pentamer特异性,包括针对癌症和传染性疾病的抗原决定簇,例如CMV,EBV,HBV,HCV,HPV,流感以及更多 的目录五聚体列表。定制Pro5®MHC I类五聚体如果您选择的特异性不在我们的范围内,则定制Pro5®Pentamer的格式与目录项相同。我们的技术专长和制造数千种不同的MHC肽复合物的经验意味着我们能够高效,高成功率地提供定制试剂。定制五角体通常需要缴纳不可退还的设置费用,该费用将针对每个项目应用一次。设置费用将不会重复用于同一Pentamer。定制五聚体的价格包括特定定制肽的合成。如果我们确信该肽会与相关的MHC等位基因充分结合,则ProImmune仅会进行定制五聚体的合成。通常,如果亲和力得分为21或更高,则将进行合成www.syfpeithi.com。如果有足够的证据支持结合,则将考虑使用评分较低的肽。匹配肽ProImmune为所有目录肽特异性和定制的Pro5®Pentamer提供匹配的肽。以1或2 mg的量冻干提供匹配的肽,保证的纯度> 70%(免疫等级)。它们适用于体外T细胞刺激实验,与单独的标准定制肽合成方法相比,可以以大大降低的成本购买。匹配的肽可以在不到一周的时间内发送出去。
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