Cerullo, P. 等人。等人。 （2010）。编码粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的溶瘤腺病毒可诱导癌症患者的抗肿瘤免疫。癌症研究。 70：4297-4309。 [PubMedID：20484030]

博士。文森佐·塞鲁洛等人。芬兰赫尔辛基大学开展了这项研究，以研究使用溶瘤病毒进行癌症基因治疗。

患者接受了表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的溶瘤腺病毒的治疗，该病毒由溶瘤病毒驱动病毒E3启动子将转基因的表达与腺病毒复制结合，从而与肿瘤环境结合。

在治疗前后分离患者的PBMC，并进行干扰素-γ (IFN-gamma) ELISPOT评估腺病毒治疗除了溶瘤作用之外是否还能引发肿瘤特异性反应。

In为了进行\"三盲”、公正和专业的分析，ELISPOT 检测外包给 ProImmune 的细胞分析核心设施服务。

提供了来自癌症患者的 23 份 PBMC 样本，ProImmune 进行了 IFN- γ ELISPOT 检测可确定细胞因子对 Survivin 和 HadV-5 ProMix™ 肽库的反应。 Survivin (BIRC5 PONAB)肽库由33个肽组成，HAdV-5 Penton肽库由140个肽组成；每个池中的肽长 15 个氨基酸，并有 11 个氨基酸重叠。

在 IFN-gamma ELISPOT 测定中对细胞样本进行三次重复分析，以确定它们对抗原刺激做出反应的潜力；使用自动 ELISPOT 酶标仪对斑点进行计数。对来自测试孔的用于IFN-γ细胞因子分泌的斑点形成细胞(SFC)的数量进行计数并调整为每百万总细胞的SFC。以图形方式显示一名患者的样本结果（图 1）。测试结果将孔与未刺激的细胞（无肽/阴性对照）以及用植物血凝素（PHA，阳性对照）刺激的细胞的孔进行比较。如果阳性结果大于或等于阴性结果的两倍（由图表上的蓝色虚线表示），则被视为显着。

图 1：

结果表明，在一些患者中，病毒治疗能够在一定程度上刺激肿瘤特异性免疫反应。这是首次在接受溶瘤腺病毒治疗的人类患者中观察到这样的反应。

对于 ProImmune 外包的 ELISPOT 服务，Cerullo 博士评论道\"从实验的计划到结束我们以极高的专业精神和高品质为指导技术援助”。

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