class=\"container-fluid\">支持数据相关产品产品使用协议BackgroundPathwaysCitations & ReviewsOn Page MenuProductsPrimary AntibodiesPhospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) AntibodyPhospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) Antibody#3385Reviews ()Citations (4)Filter : 白平衡使用 Phospho 对亲本 (COS) 或 NMDA 受体 1 (GluN1) 转染 (COS/GluN1) 细胞（未经处理或毛喉素处理（30 mM，持续 20 分钟））的提取物进行蛋白质印迹分析-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) Antibody.Show LessShow More 图片库详细了解我们如何获取图像 × Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) Antibody 3385 Toggle Between Dark and Light ModesFilter:WB 对亲本 (COS) 或 NMDA 受体 1 (GluN1) 转染的提取物进行蛋白质印迹分析(COS/GluN1) 细胞，未经处理或毛喉素处理（30 mM，20 分钟），使用磷酸-NMDA 受体 1 (GluN1) (Ser897) 抗体。购买#3385Cat。#SizeQty.Price3385S100µl $345

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产品信息

产品使用信息ApplicationDilutionWestern Blotting1:1000StorageSupplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ ml BSA 和 50% 甘油。储存于 –20°C。不要等分抗体。方案选择您的方案Western BlottingPRINT

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Western Blotting Protocol

对于蛋白质印迹，将膜与稀释的一抗在 5% w/v BSA、1X 中孵育TBS，0.1% Tween® 20，4°C 温和e 摇匀，过夜。

注：推荐的抗体稀释度请参考一抗产品网页。

A.溶液和试剂

从样品制备到检测，Western Blot 所需的试剂现在都在一个方便的试剂盒中：#12957 Western Blotting Application Solutions Kit

注意：用反渗透去离子（ ... (#12498) 要制备 1 L 1X TBS：将 100 ml 10X 添加到 900 ml dH2O，混合。1X SDS 样品缓冲液：蓝色上样包 (#7722) 或红色上样包 (#7723) 通过添加准备新鲜的 3X 还原上样缓冲液1/10 体积的 30X DTT 到 1 体积的 3X SDS 加载缓冲液。用 dH2O 稀释至 1X。10X Tris-甘氨酸 SDS 电泳缓冲液：(#4050) 要制备 1 L 1X 电泳缓冲液：将 100 ml 10X 电泳缓冲液添加到 900 ml dH2O 中，混合。10X Tris-甘氨酸转移缓冲液：(#12539)公关制备 1 L 1X 转移缓冲液：将 100 ml 10X 转移缓冲液添加到 200 ml 甲醇 + 700 ml dH2O 中，混合。10X Tris 缓冲盐水与 Tween® 20 (TBST)：(#9997) 要制备 1 L 1X TBST：添加 100 ml 10X TBST 加入 900 ml dH2O，混合。脱脂奶粉：(#9999)。封闭缓冲液：1X TBST 含 5% w/v 脱脂奶粉；对于 150 ml，将 7.5 g 脱脂奶粉添加到 150 ml 1X TBST 中并充分混合。洗涤缓冲液：(#9997) 1X TBST。牛血清白蛋白 (BSA)：(#9998)。一抗稀释缓冲液：1X TBST 与 5 ％牛血清白蛋白；对于 20 ml，将 1.0 g BSA 添加到 20 ml 1X TBST 中并充分混合。生物素化蛋白 Ladder 检测包：(#7727)。蓝色预染蛋白标记物，宽范围 (11-250 kDa)：(#59329)。印迹膜和纸：(#12369) 该方案已针对硝酸纤维素膜进行了优化。通常建议孔径为 0.2 µm。与 HRP 偶联的二抗：抗兔 IgG，HRP 连接抗体 (#7074)。检测试剂：SignalFire™ ECL 试剂 (#6883)。B.蛋白质印迹样品制备的通用方案。通过在所需时间内添加含有调节剂的新鲜培养基来处理细胞。从培养物中吸出培养基；用 1X PBS 清洗细胞；吸出。通过添加 1X SDS 样品缓冲液（6 孔板每孔 100 µl 或 10 cm 直径板每孔 500 µl）来裂解细胞。立即从板上刮下细胞并将提取物转移到微量离心管中。保持在冰上。超声处理 10-15 秒以完成细胞裂解和剪切 DNA（以降低样品粘度）。将 20 µl 样品加热至 95-100°C 5 分钟；在冰上冷却。微量离心 5 分钟。

将 20 µl 上样到 SDS-PAGE 凝胶（10 厘米 x 10 厘米）上。

注意：上样预染分子量标记（#59329，10 µl/ lane) 来验证电转移和生物素化蛋白质阶梯 (#7727, 10 µl/lane) 以确定分子量。

电转移到硝酸纤维素膜 (#12369).C.膜封闭和抗体孵育

注意：体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜；对于不同尺寸的膜，调整体积相应地。

我。膜封闭（可选） 转移后，在室温下用 25 ml TBS 洗涤硝酸纤维素膜 5 分钟。将膜在 25 ml 封闭缓冲液中室温孵育 1 小时。用 15 ml TBST 洗涤 3 次，每次 5 分钟。二。一抗孵育在 10 ml 一抗稀释缓冲液中孵育膜和一抗（按照产品网页中推荐的适当稀释度和稀释剂），在 4°C 下轻轻搅拌过夜。用 15 ml TBST 洗涤 3 次，每次 5 分钟。将膜与 Anti-rabbit IgG、HRP-linked Antibody（#7074，1:2000）和抗生物素、HRP-linked Antibody（#7075，1:1000–1:3000）一起孵育，以检测 10 ml 中的生物素化蛋白质标记物在室温下轻轻搅拌封闭缓冲液 1 小时。用 15 ml TBST 洗涤 3 次，每次 5 分钟。继续检测（D 部分）。蛋白质检测使用说明：将膜结合的 HRP（抗体结合物）洗涤 3 次，每次 5 分钟在 TBST 中进行测试。通过稀释一份 2X 试剂 A 和一份 2X 试剂 B（例如，对于 10 ml，添加 5 ml 试剂 A 和 5 ml 试剂 B）来制备 1X SignalFire™ ECL 试剂 (#6883)。充分混合。将底物与膜一起孵育 1 分钟，去除多余的溶液（膜保持湿润），用塑料包裹并暴露在 X 射线胶片上。

* 避免反复接触皮肤。

2005 年 6 月发布

2020 年 6 月修订

方案 ID：10

特异性/灵敏度Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) 抗体仅在丝氨酸 897 磷酸化时检测转染的 NMDA 受体 1 (GluN1)。物种反应性：

人类

根据 100% 序列同源性预测反应的物种：抗原用于生产该抗体的序列与此处列出的物种具有 100% 的序列同源性，但反应性尚未经过 CST 测试或确认有效。我们的抗体性能保证不涵盖对这些物种使用该产品.

Mouse, Rat

来源/纯化

多克隆抗体是通过使用与人 NMDA 受体 1 的 Ser897 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种而产生的(GluN1)。抗体通过蛋白 A 和肽亲和层析纯化。

背景

N-甲基-D-天冬氨酸受体 (NMDAR) 形成至少一个 NR1 和一个 NR2A-D 亚基的异二聚体。通过选择性剪接 NR1 转录物和 NR2 亚基的差异表达，产生具有不同大脑分布和功能特性的多受体亚型。 NR1 亚基结合共激动剂甘氨酸，NR2 亚基结合神经递质谷氨酸。 NMDA 受体的激活或离子通道的打开允许 ​​Na+ 和 Ca2+ 离子流入细胞，而 K+ 流出细胞 (1)。每个亚基都有一个细胞质结构域，可以直接被蛋白激酶/磷酸酶修饰 (2)。 PKC 可以磷酸化 NR1 亚基(NMDAR1) Ser890/Ser896 受体和 PKA 可以磷酸化 Ser897 位点的 NR1 (3)。 PKC 对 NR1 的磷酸化会降低其对钙调蛋白的亲和力，从而阻止钙调蛋白对 NMDAR 的抑制作用 (4)。 PKA 对 NR1 的磷酸化可能会抵消神经钙蛋白对受体的抑制作用 (5)。 NMDAR 介导长时程增强和缓慢的突触后兴奋，这在学习、神经发育和神经可塑性中起着核心作用 (6)。

Liu, X.B.等。 (2004) J Neurosci 24, 8885-95.Westphal, R.S.等。 (1999) Science 285, 93-6.Tingley, W.G. 等。 (1997) J Biol Chem 272, 5157-66.Hisatsune, C. 等。 (1997) J Biol Chem 272, 20805-10.Raman, I.M. 等。 (1996) Neuron 16, 415-21.Makhinson, M. 等人。 (1999) J Neurosci 19, 2500-10.Pathways

探索与该产品相关的通路。

选择您的通路阿尔茨海默病帕金森氏病×上游/下游蛋白质

STRING - 已知和预测的蛋白质-蛋白质相互作用。

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UniProt ID：Q05586

Entrez-Gene Id:2902

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