L-Lactate Assay Kit II

乳酸是人类中间代谢过程中形成的乳酸的主要立体异构体，常被用作压力的生理指标。它在血清中的测定（血液中的正常范围为 0.5-2.0 mM）在各种疾病的诊断和医疗管理中非常重要，例如组织缺氧、糖尿病、循环衰竭和血液病症。与典型的乳酸-LDH 测定不同，这种新的乳酸测定试剂盒提供了一种简单、可靠的方法来定量生物样品中的乳酸，例如血液（血清和血浆）、培养物和发酵培养基等。在测定中，乳酸经酶反应氧化产生显色产物，可在570 nm处进行比色测定，其显色强度与乳酸浓度成正比，因此可根据乳酸标准品准确计算样品乳酸浓度。弗里特里亚LClick here forFREE TRIAL OPTIONProduct Overview Protocol MSDS Reference FAQ

Sample Type

Plasma,Serum,Cell culture supernatant, other body fluid

Components

Components

样品类型

p>

方法

570nm比色法

标准曲线

灵敏度

2µM-100µM

反应时间

30分钟

应用

用于生物学研究：生物样品中的 L-乳酸测量用于药物/药学研究：药物对 L-乳酸代谢的影响

储存

-80°C

注意事项

需要但未提供的材料

A plate reader capable of m测量 570nm 处的吸光度

可调移液器和重复移液器

蒸馏水（milliQ 或 HPLC 级）

透明平底 96 孔板（如果不包括）在购买的试剂盒中

ShippingIcepacks

试剂制备

注意：所有试剂都是冷冻的。我们建议您在打开前旋转小瓶。

1. L-Lactate Assay Buffer(10x) 注意：请不要在提供的 L-Lactate Assay Buffer 瓶中进行稀释。瓶中含有 10ml 的 10x L-Lactate Assay Buffer。测定缓冲液在使用前必须平衡至室温。请为检测配制适量的 1xL-Lactate Assay Buffer，例如用 9ml 蒸馏水稀释 1ml 的 10xL-Lactate Assay Buffer。如果需要，准备额外的稀释测定缓冲液。储存在 -80?C.2。 L-乳酸标准品 (10x) 注意：请不要在提供的 L-乳酸标准品小瓶本身中进行稀释。小瓶包含 100µl 1mM L-乳酸标准品。标准品在使用前必须平衡至室温。用 900μl 稀释的 L-乳酸检测缓冲液稀释 100μl 的 1mM L-乳酸标准品，制备 100μM L-乳酸标准品。如果重复测定，1ml 稀释的标准品足以制作 3 条标准曲线。储存在 -80?C.3。检测探针小瓶包含 45μl 检测探针。足够 100 个孔。使用前必须将检测探针平衡至室温。避光。储存在 -80?C.4。 L-乳酸酶混合物小瓶含有 55μl L-乳酸酶混合物。使用前必须将酶混合物在冰上解冻。足够 100 个孔。储存在-80?C。

方案

1.样品制备

血液、血清、血浆、其他体液，或细胞培养物上清液可以通过一系列样品稀释液（1/2；1/4；1/8；……）直接测量，以确保读数在标准范围内曲线范围。您的样品可以用 dH2O 或稀释的 L-乳酸检测缓冲液稀释。但是，请记住，如果样品（如溶血血清/血浆）含有高水平的能够将乳酸转化为丙酮酸的乳酸脱氢酶，那么样品很重要脱蛋白。每孔加入 50μl 样品。我们建议样品一式两份进行检测。注意：如果准备好的样品没有在同一天进行检测，请将​​样品储存在 -80°C 下。如果样品需要脱蛋白，请确保在冷冻前对样品脱蛋白。脱蛋白样品在-80°C 下可稳定保存 1 个月。对于冷冻样品，必须在检测前立即稀释样品。

2.标准曲线制备

添加 50µl、40µl、30µl , 20µl, 10µl, 5µl, 1µl, 和 0µl 稀释的 L-Lactate Standard 到每个孔中，然后用稀释的 L-Lactate Ass 调整体积到 50µl/well是缓冲液。我们建议对 L-乳酸标准品进行双份检测。

3.反应液配制每孔需配制50μl反应液，1ml反应液配制如下： : 982µlL-Lactate Assay Buffer(1x)10µlL-Lactate Assay Enzyme Mix8 µlAssay Probe1ml Reaction Solution is enough for ~20 wells. Prepare appropriate amount of Reaction Solution for the number of assays to be performed. 注意：请不要保留任何剩余物反应溶液，因为它必须在您运行分析之前新鲜制作。如果使用旧的反应溶液，检测将无法进行。

4.进行检测

a.将反应液充分混匀，每孔加入50μl反应液至含有L-乳酸标准品和测试样品的孔中。b．在 37°C 培养箱中孵育反应 30 分钟。在酶标仪中测量 570 nm 处的吸光度。

5.计算

一个。平均每个 L-乳酸标准、测试样品和空白的复制孔的 OD570 nm 值。然后，通过从所有 samplereadings.b 中减去从空白派生的值来校正背景。通过绘制每个 L-乳酸标准品的 OD570 nm 值作为 L-乳酸浓度的函数来制作标准曲线。这可以用 excel spreadsheet.c 来完成。使用从标准曲线的线性回归得到的方程计算样品中 L-乳酸的值。

L-乳酸(μM)= [ (校正吸光度)-(y-intercept)]/Slope

材料安全数据表

日期：2017-09-21

1.产品和公司标识

1.1 产品标识

产品名称：L-Lactate Assay Kit II

货号：1200051002, 120005100P, 1200052002, 12005200P

1.2 物质或混合物的相关确定用途和不建议的用途

供研究使用

1.3 供应商详情安全数据表

公司：Eton Bioscience Inc

TollFree:1-800-758-1630

Tel:1-800-758-1630

传真：1-800-507-2912

1.4 紧急电话号码

1-800-758-1630

2.危害识别

2.1 物质或混合物的分类

不是有害物质或混合物

2.2 GHS 标签元素，包括防范说明

不是有害物质或混合物

2.3 其他危害

无

3.成分/成分信息

3.1 物质

L-乳酸检测缓冲液

L-Lactate Assay Enzyme Mix

组件

CAS#

组件

CAS#

磷酸二氢钾

7778-77-0

磷酸二氢钾

7778-77-0

磷酸二氢钾

7758-11-4

磷酸二氢钾

7758-11- 4

水

7732-18-5

乳酸氧化酶

9028-72-2

L-乳酸检测标准品

检测探针

组件

CAS#

组件

CAS#

L-乳酸钠

867-56- 1

DMSO

67-68-5

磷酸二氢钾

7778-77-0

磷酸二氢钾

7758-11-4

水

7732-18-5

4.急救措施

4.1 急救措施说明

眼神接触

检查并取下隐形眼镜并用大量清水冲洗；用手指分开眼睑以确保充分冲洗；打电话给医生

皮肤接触

用大量的水冲洗；脱去受污染的衣服和鞋子;打电话给医生

吸入

移到空气新鲜处。如果没有呼吸，请进行人工呼吸；呼叫一个 p医师

摄取

如果吞咽，切勿让失去知觉的人经口喂食任何东西。用水漱口；呼叫医生

4.2 最重要的症状和影响，包括急性和延迟

无可用信息

4.3 任何需要立即就医和特殊治疗的指示。

无可用信息

5.消防措施

5.1 灭火媒体

合适的灭火剂

喷水、抗溶泡沫、干粉或二氧化碳

5.2 物质或混合物引起的特殊危害

无可用信息

5.3 给消防员的建议

佩戴自给式呼吸器和防护服，以防止接触皮肤和眼睛。

6。意外泄露措施

6.1 个人防护措施、防护设备和应急程序

使用全套个人防护装备。疏散人员到安全区域。避免吸入蒸汽、烟雾或气体。

6.2 环境预防措施

防止进一步泄漏或溢出。防止产品进入下水道。

6.3收容和清理的方法和材料

保存在合适的密闭容器中以备处置

7.处理和存储

7.1 安全操作注意事项

避免皮肤/眼睛接触。根据需要使用防护设备。重新使用前清洗受污染的衣物。

7.2安全储存条件，包括任何不相容性

保持容器密闭。储存在-80°C。

7.3 具体最终用途

无可用数据。

8.曝光控制/个人信息

8.1 控制参数

本产品不含职业接触限值的有害物质。

8.2 曝光控制

工程控件

/p>

提供淋浴和洗眼台

个人防护装备

眼睛防护

佩戴护目镜

皮肤防护

穿防护服

手部防护

戴防护手套

呼吸防护

佩戴 NIOSH/MSHA 批准的呼吸器

9.理化性质

9.1 基本理化性质信息

L-Lactate Assay Buffer

外观

液体，无色

pH

7.0

熔点

无可用数据

冰点

无可用数据

沸点

无可用数据

D密度

无可用数据

水溶性

可溶

L-乳酸标准

外观

液体，无色

pH

7.0

熔点

无可用数据

冰点

无可用数据

沸点

无可用数据

密度

无可用数据

水溶性

可溶

L-Lactate Assay Enzyme Mix

外观

液体，黄色

pH

无数据可用

熔点

无数据可用

冰点

无可用数据

沸点

无可用数据

密度

无可用数据

水溶性

可溶

检测探针

外观

液体，无色

pH

无可用数据

熔点

无可用数据

凝固点

无可用数据

沸点

无可用数据

密度

无可用数据

水溶性

水溶性

9.2 其他安全信息

无可用数据。

10.稳定性和反应性

10.1反应性

无可用数据

10.2化学稳定性

在推荐的存储条件下稳定。

10.3危险反应的可能性

无可用数据。

10.4要避免的条件

无可用数据

10.5不相容材料

强氧化剂

10.6 有害分解产物

在火灾条件下形成的危险分解产物：碳氧化物

11.毒理学信息

11.1毒理作用信息

本产品的毒理作用尚未深入研究。

12。生态信息

12.1毒性

避免释放到环境中

12.2持久性和可降解性

无可用数据

12.3.生物累积潜力

无可用数据

12.4土壤中的流动性

无可用数据

12.5PBT和vPvB评估结果

无可用数据

12.6其他不良影响

无可用数据

13.处置信息

13.1废物处理方法

按照wi处理地方、州和联邦法规。

p>

14.运输信息

DOT:

正确的运输名称: noneNon-Hazardous for transport: 这种物质被认为是非运输危险的被认为对运输无危险

ADR/RID

正确的运输名称: noneNon-Hazardous for transport: 这种物质被认为是非危险运输的

15.法规信息

欧盟风险和安全phrases:

R36/37/38: 刺激眼睛/呼吸系统/皮肤

16.其他信息

以上信息被认为是准确的，代表了我们目前可获得的最佳信息。但是，我们不对此类信息作出适销性保证或任何其他明示或暗示的保证。 Eton Bioscience Inc. 对因处理或接触上述产品而导致的任何损害或其他后果概不负责。

1. Marbach E. P. 和 M. H. Weil (1967) 血乳酸和丙酮酸的快速酶促测量。临床。化学。 13：314-320.2。 van Ginneken、V. R. Boot、T. Murk、G. van den Thillart 和 P. Balm.2004。运动后血浆底物和肌肉乳酸反应鲤鱼和鳟鱼的过度运动：限制乳酸穿梭的适应症。动画。生物学。莱顿内斯。 54:119–130.3。 Noordally O, Vincent J-L (1999) 重症监护中新型快速乳酸分析仪的评估。 Intens Care Med 25:508-513.

这个实验用的是什么酶？

是乳酸氧化酶。

L-Lactate Assay Kit I 和 L-Lactate Assay Kit II 有什么区别？

以下是 L-乳酸检测试剂盒 I 和 L-乳酸检测试剂盒 II 之间的一些差异。

L-乳酸检测试剂盒 I

标准曲线范围：50μM-3200μM

所用酶：L-LDH

比色阅读器兼容

Components：检测溶液和序列前稀释标准品

L-乳酸检测Kit II

标准曲线范围：2μM-100μM

所用酶：乳酸氧化酶

比色阅读器兼容

组分：检测缓冲液,Enzyme mix,Assay Probe,and Assay standard

这个检测的成分是什么？

不幸的是它是专有的。

我每次都需要制作标准曲线吗？

p>

是的，这是必要的，因为您是根据标准曲线计算样本浓度的。请不要使用代表Lact吃协议中的标准曲线来计算样品的浓度。

此测定需要多少样品？

p>

最终用户必须进行实验以确定读数落在标准曲线范围内的最佳样本量。

我可以使用冷冻样品吗？

虽然最好使用新鲜样本进行化验，但您也可以使用冷冻样本。如果您不是一次性使用冷冻样品，请在将样品放入冰箱之前将其等分，以防止样品因反复冻融循环而降解。

协议建议在 570nm 处测量吸光度。 565nm够近吗？

吸光度设置在560~580nm之间就可以了。

为什么我的标准曲线值与数据表上显示的不同？

许多因素会影响该值，例如室温、孵育时间、处理等。

是否提供试用套件?

是的，它们可供首次使用的客户使用，但是，您将负责运费和手续费。请联系

了解更多详情。

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