武汉优博生物技术有限公司开发的河豚毒素ELISA检测试剂盒，检测限量达到2 ppb,在美国、日本、俄罗斯、北欧等食品企业、政府检验机构广为应用，质量合格率达到100%，误差1%左右，大量的实验数据标明，河豚毒素检测试剂盒技术水平国际一流水平。

与LC-MS仪器对比试验，结果符合率100%，批间差异小于0.1%，试剂盒稳定高，抗干扰力强。

1. ELISA标准工作曲线

按照竞争性ELISA操作过程，对不同稀释度的河豚毒素标准液进行测定，以各孔平均OD值与对照组的OD值比值的logit函数为纵坐标，以不同浓度河豚毒素标准品浓度的对数为横坐标，绘制出标准曲线。结果如图6所示：线性回归方程为y＝-1.9695x＋3.3899，R2＝0.9902；线性范围为5-500 ng/mL，最低检测限为5 ng/mL。

图1 ELISA标准工作曲线（纵坐标不是抵制率logit(B/B0)）

2. 回收率实验

添加250 ng和500 ng的河豚毒素标准品的1 g河豚鱼鱼肉中，通过竞争性ELISA检测结果如表所示：添加250 ng标准品时，回收率为159%，添加500 ng标准品时，回收率为108%。产品回收率偏高，我们分析可能是由于洗板次数太多，导致少量的抗体抗原脱离，或者是由于实验时间偏长，抗体的效价减弱引起。产品回收率偏高，不影响检测灵敏度，由于产品检测限较低(5 ng/mL),所以该产品可以满足日常对河豚鱼的检测工作要求。

表2模拟样品回收率实验

3. 稳定性实验

对浓度为10、50、100、150 ng/mL的标准品进行检测，结果如表所示：10-150 ng/mL 4个标准品浓度变异系数为1.93-3.77%，平均变异系数为2.76%。

变异系数CV %=（标准偏差SD /平均值Mean）×100%