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【求助】谁做过Hif1a的WB，能在120KD做出来吗
seven7
上样量30ug，转膜 PVDF 0.45的膜 350mA 2h湿转。
抗体4度过夜
大家有什么不清楚的，可以再问哦，很乐意为大家解决难题，哈哈
你好！我做的HIF-1用的NOVUS的抗体，在1:500时出现很多的条带，集中在72-170KD，其中在72KD上方出现很深的条带，后来一抗稀释为1:1000，其他的条带都不见了，只是剩余72KD上方的条带。请问有没有出现过这种情况啊，是什么问题导致的？
tiantang0001 2011-07-29
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tiantang0001 你好！我做的HIF-1用的NOVUS的抗体，在1:500时出现很多的条带，集中在72-170KD，其中在72KD上方出现很深的条带，后来一抗稀释为1:1000，其他的条带都不见了，只是剩余72KD上方的条带。请问有没有出现过这种情况啊，是什么问题导致的？我也是这样的，NOVUS的抗体在72KD那条是最深的，我觉得即使稀释后，如果曝光时间增加的话，其它条带也是可以出来的，我想问你出过120KD的条带吗
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美国老王 我也是这样的，NOVUS的抗体在72KD那条是最深的，我觉得即使稀释后，如果曝光时间增加的话，其它条带也是可以出来的，我想问你出过120KD的条带吗最近也做HIF-1a，做出来的结果似乎跟几位接近，也是72KD最亮；120KD有条带，但不是特别突出，其上下有大量非特异条带。请教一下，出现非特异条带的原因：是由于蛋白是从组织提取的原因，还是因为HIF-1a降解（样品已经在-70度保持了约1月）？我的抗体是abcom的
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