Description
CatalogueNumber	HTS055M
BrandFamily	Chemicon®
TradeName	ChemiScreen Chemicon
Description	ChemiSCREEN™MembranePreparationRecombinantHumanCXCR5ChemokineReceptor
Overview	HumanCXCR5
BackgroundInformation	CXCR5(alsoknownasBLR1)isaGPCRthatbindsselectivelytothechemokineCXCL13(alsoknownasBLCandBCA-1)tomediateimmunesystemdevelopmentandfunction(Försteretal.,1996;Gunnetal.,1998).CXCR5cooperateswithCCR7todeterminefunctionalorganizationoflymphoidorganssuchaslymphnodesandPeyer’spatches(Ohletal.,2003).Inaddition,CXCR5mediatesmigrationofBcellsintothefolliclesofthesplenicwhitepulp,thuspermittingantigendepositiononfolliculardendriticcells(Försteretal.,1996;Cinamonetal.,2008).Patientswithrheumatoidarthritis(RA)displayedupregulatedexpressionofCXCR5toagreaterextentthanotherchemokinereceptors,andCXCR5-nullmicesubjectedtoantigen-inducedarthritisdisplayreducedjointdestruction(Schmutzetal,2004;Wengneretal,2007).Therefore,CXCR5representsapotentialtargetfortreatmentofrheumatoidarthritis.Millipore"sCXCR5MembranePreparationforGTPγSAssayisacrudemembranepreparationmadefromtheproprietarystablerecombinantcelllinethatisalsousedforMillipore’sCXCR5CalciumOptimizedCellLine(HTS055C).ThisCXCR5MembranePreparationhasbeenoptimizedforlowbasalactivityinGTPγSbindingassays;thusitisanidealHTStoolforscreeningofcompoundsforagoNISTandantagonistactivities.ThemembranepreparationsexhibitsEC50of1.8nMforCXCL13inaGTPγSbindingassay.

ProductInformation
Format	Membranes
Presentation	Liquidinpackagingbuffer:50mMTrispH7.4,10%glyceroland1%BSAwithnopreservatives. Packagingmethod:Membraneproteinwasadjustedtotheindicatedconcentrationinpackagingbuffer,rapidlyfrozen,andstoredat-80°C.

StorageandShippingInformation
StorageConditions	Storeat–70°C.Productisstableforatleast6monthsfromthedateofreceiptwhenstoredasdirected.Donotfreezeandthaw.

Applications
Application	HumanCXCR5GPCRmembranepreparationforRADIoligandbindingAssays>PγSbinding.
KeyApplications	Radioligandbindingassay GTPγSbinding
ApplicationNotes	RadioligandbindingassayandGTPγSbinding

BIOLOGicalInformation
EntrezGeneNumber	NM_001716
GeneSymbol	CXCR5 BLR1 MDR15
GPCRClass	A
HostCells	Chem-5
ProteinTarget	CXCR5
TargetSub-Family	Chemokine
UniProtNumber	P32302
IncubationConditions	MembranesarepermeABIlizedbyadditionofsaponintoanequalconcentrationbymass,thenmixedwith[35S]-GTPγS(finalconcentrationof0.3nM)in20mMHEPES,pH7.4/100mMNaCl/10mMMgCl2/0.5μMGDPinanonbinding96-wellplate.UnlabeledCXCL13wasaddedtothefinalconcentrationindicatedinFigure1(finalvolume100μL),andincubatedfor30minat30°C.ThebindingreactionistransferredtoanFBfilterplate(MilliporeMAHFB1H)previouslyprewettedwithwater.Theplateiswashed3times(1mLperwellperwash)withcold10mMsodiumphosphate,pH7.4,thendriedandcounted. Onepackagecontainsenoughmembranesforatleast200assays(units),whereoneunitistheamountofmembranethatwillyieldgreaterthan1000cpmspecificCXCL13-stimulated[35S]-GTPγSbinding.

PhysicochemicalInformation

Dimensions

MaterialsInformation

MaterialsInformation

Millipore 提供三种不同的 Immobilon PVDF 膜，是针对不同的蛋白质印迹应用的理想选择。 现在我们还 提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治。   与硝酸纤维素膜相比，Immobilon 膜具有多种优点。 它们不易破裂或卷 曲，便于裁剪且在切割过程中不会碎裂。 它们还有低背景、广泛溶剂相容性以及优异的着色能力。 此外，它们可以重复检测。 Immobilon-P 膜（沃比森-供应） ·         0.45μm 孔径 ·         建议用于大多数免疫印迹，特别在蛋 白质大于 20kDa 时 ·         Millipore 的快速免疫检测实验方法不需要膜封闭并缩短洗涤时间，将检测时间至少减少了两个小时，而不致降低灵敏 度或特异性 用于高通量实验室的印迹三明治 ·         当您需要处理多个印迹时，印迹三明治是一种便利省时的选择。 我们的印迹三明 治包含多片 Immobilon-P 膜，其中插入了按规格裁切的多张层析级印迹纸。 转印滤纸 ·         按照大多数免疫印迹尺寸进行裁切的层析级转印滤纸。 Immobilon-PSQ 膜（沃比森-供应） ·         0.2μm 孔径和大的内表面面积 ·         较其它膜具有更高的 蛋白质吸附率和测序得率 ·         建议用于小于 20kDa 的印迹蛋白质 ·         防止小分子量的蛋白质的渗漏 Immobilon-FL 膜（沃比森-供应） ·        针对荧光应用进行优化的转印膜 ·         极低的背景提高了所 有荧光检测实验的灵敏度 ·         与所有常用的荧光探针（所有激发和发射波长）兼容 ·         是多态性检测和化学荧光应用的理想选择