Yeast-TAP 标记的 ORF 库允许使用两种亲和力选择来纯化和选择酵母蛋白质组和相关组分串联的步骤,使得能够开发一系列高通量功能测定。通过用高亲和力表位标记每个 ORF 并从其天然染色体位置表达蛋白质,可以通过免疫检测来量化对数生长期表达的蛋白质普查。通用标签。
酵母 Tap FusionC 端 TAP 插入盒包含修改版 TAP(串联亲和纯化)标签的编码区,该标签由钙调蛋白结合肽组成,一个 TEV 裂解位点、两个金黄色葡萄球菌蛋白 A 的 IgG 结合域和一个选择标记。
Yeast Tap FusionC 端 TAP 插入盒包含修饰的编码区TAP(串联亲和纯化)标签的版本,由钙调蛋白结合肽、TEV 切割位点、两个 IgG 结合域组成金黄色葡萄球菌蛋白 A 和选择性标记。
C 端 TAP 插入盒包含 TAP(串联亲和纯化)标签修改版本的编码区,该标签由钙调蛋白结合肽、TEV 裂解组成位点、金黄色葡萄球菌蛋白 A 的两个 IgG 结合域以及可选择标记。
亮点允许在串联 A 膜结合蛋白中使用两个简单的亲和选择步骤来纯化和选择酵母蛋白质组和相关成分为方便起见,子集已排列在单独的平板中 背景菌株 = MatA (BY4741)注我们提供由领先学术实验室开发的某些克隆资源。其中许多资源可以满足其他商业实体无法提供服务的专业研究社区的需求。为了将这些作为公共资源提供,我们依靠学术实验室来进行质量控制。
因此,这些是以贡献机构\"按原样”提供的格式提供,没有额外的产品验证或保证。我们对任何错误或性能问题不承担任何责任。其他信息可以在产品手册以及相关的已发表文章(如果有)中找到。或者,可以直接联系来源学术机构进行故障排除。
各个菌株装在含有 YPD 甘油储备培养物以及 15% 甘油和 100 µg/mL 羧苄青霉素的试管中。虽然 scTAP 菌株以 YPD 培养基提供,但也可以使用 SD 完整培养基或 SD -HIS 培养基。可以通过我们的克隆查询来查询和购买该文库中的各个菌株。
TAP 文库提供在 96 孔微量滴定板中,其中含有 YPD 中的冷冻甘油储备培养物以及 15% 甘油和 100 µg/mL 羧苄青霉素。虽然 scTAP 菌株以 YPD 培养基提供,但也可以使用 SD 完整培养基或 SD-HIS 培养基。菌株是按蛋白质表达大小从大到小排列在平板中,平板名称GS1代表高表达,GS5代表低表达。此外,为了方便起见,膜蛋白子集已排列在单独的板中。请参阅随该系列提供的 USB 以了解表达类别名称。
使用 TAP 标签纯化生物分子/蛋白质复合物受到欧洲和澳大利亚授予的专利 (EP1105508B1、AU07629621) 的保护,并且加拿大、日本和美国的专利申请(参见国际专利公开号 WO-0009716)。
有关用于纯化生物分子/蛋白质复合物的许可信息,请联系 Cellzome AG, Meyerhofstrasse 1, 69117德国海德堡,邮箱:info@cellzome.com。
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蛋白质的丰度范围为每个细胞少于 50 到超过 106 个分子,其中许多,包括必需蛋白质和大多数转录因子,其水平不易通过其他蛋白质组学技术检测到,也无法通过 mRNA 水平或密码子偏倚测量来预测。
Yeast Tap Fusion - 1蛋白质的范围从少于 50 到超过 106 个分子/细胞,其中许多蛋白质(包括必需蛋白质和大多数转录因子)的水平不易通过其他蛋白质组学技术检测到,也无法通过 mRNA 水平或密码子偏倚测量来预测。Yeast Tap Fusion - 2
蛋白质丰度范围从少于 50 到更多每个细胞超过 106 个分子,其中许多分子(包括必需蛋白质和大多数转录因子)的水平不易通过其他蛋白质组学技术检测到,也无法通过 mRNA 水平或密码子偏倚测量来预测。
酵母 Tap Fusion - 2蛋白质丰度范围从少于 50 到超过 106 个分子/细胞,其中许多蛋白质(包括必需蛋白质和大多数转录因子)的水平不易通过其他蛋白质组学技术检测到,也无法通过 mRNA 水平或密码子偏倚测量来预测.
S. Ghaemmaghami 等人,酵母蛋白质表达的全局分析。Nature. 425(6959), 737-741(2003 年 10 月 16 日)。 [Letters to Nature]
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