Western blots 需要多个步骤 - 样品制备、样品加载、电泳、蛋白质转移、抗体孵育和信号检测 - 因此重要的是确保每一步都正确完成。
为了获得成功的 Western blot,我们提供:
上样对照使用 Diagenode 的 H3pan 单克隆抗体作为核样品的上样对照,以比较蛋白质表达
使用 H3pan 单克隆抗体进行蛋白质印迹分析对来自不同细胞类型的全细胞提取物 (30 μg) 进行分析(泳道 1:HeLa,泳道 2:K562,泳道 3:MCF7,泳道 4:U2OS,泳道 5:HepG2,泳道 6:Jurkat,泳道 7:NIH3T3,泳道图 8:E14Tg2a 小鼠 ES 细胞)使用针对 H3 的单克隆抗体。抗体被稀释在含有 5% 脱脂牛奶的 TBS-Tween 中以 1:1,000 的比例编辑。左侧显示标记(以 kDa 为单位),右侧显示目的蛋白的位置。
为什么需要上样对照?
验证在凝胶上加载相同数量的样品以确认电转移在各条线上均等地完成以检查抗体孵育后的信号检测在各条线上是否均匀了解有关此抗体的更多信息
Blue ladder-HRP 单克隆抗体直接在胶片上可视化您的标记蛋白质印迹中使用的大多数预染蛋白质 MW 标记包含用蓝色染料标记的片段。 Diagenode 开发了一种革命性的新抗体,它可以与这种蓝色染料发生特异性反应,从而可以直接观察印迹上的不同标记片段。这使得标记物的定位以及蛋白质的准确检测变得更加容易。
更快、更容易的蛋白质检测 - 手动 ma不再需要直接在 X 射线胶片上显影您的标记减少阶梯消耗与大多数蓝染阶梯兼容出色的特异性,无交叉反应或背景使用 Diagenode Blue ladder - HRP 单克隆抗体的蛋白质印迹分析 5 种不同蛋白质 MW 标记的 PAGE 分析:1. Page Ruler Plus(Thermo,目录号 26619); 2. Color Plus 范围广泛(NEB,货号 P7711); 3. Page Ruler(未染色,Fermentas,目录号 SM0661); 4. Spectra Multicolor(Fermentas,目录号 SM1859); 5. Precision Plus(Biorad,目录号 161-0373)。将 4 μl 的每种标记物加载到凝胶上。右图显示了使用标准的 Western blot 协议使用 Diagenode Blue ladder - HRP 抗体(货号 C1520202)稀释 1:1,000 进行的 Western blot 分析。使用 Diagenode Blue ladder - HRP monoc 进行蛋白质印迹分析克隆抗体 对来自不同物种的蛋白质提取物进行 SDS-PAGE,并使用 Diagenode Blue ladder - HRP 抗体(目录号 C15200202)(按 1:1,000 稀释)进行蛋白质印迹分析。结果如右图所示。左图显示了凝胶的丽春红染色。该图清楚地表明该抗体不与所测试物种的任何蛋白质发生反应。了解更多 新! Blue ladder 单克隆抗体可用
在 WB 中验证的抗体Diagenode 提供精选的抗体以在蛋白质印迹中获得最高质量的结果。我们抗体的高灵敏度和特异性可确保获得最准确的结果。
感言我成为 Diagenode 客户已有两年多了。我使用了Diagenode提供的针对组蛋白修饰H3K4me3、H3K4me2、H3K4me1、H3k27me3、H3K9ac、H3K27ac等的抗体来进行western blots。这些抗体在Pristio中的特异性很高nchus pacificus 样品,通过使用与同步培养样品平行运行的多个阴性和阳性对照进行确认,确保了成功和可重复的结果。
另外,我对 Diagenode 人员的服务和支持感到满意。他们会迅速回复我的电子邮件并提供非常有帮助的建议。非常感谢!
Vahan Serobyan,德国图宾根马克斯普朗克发育生物学研究所 Ralf J. Sommer 教授博士使用针对 CRISPR/Cas9 的 Diagenode 抗体进行蛋白质印迹分析(Cat.编号 C15200229) 使用针对 CRISPR/Cas9 的 Diagenode 抗体,在含有 3% NFDM 的 PBS-T 中以 1:4,000 稀释,对转染 Cas9 的 HeLa 细胞(泳道 1)或未转染细胞(泳道 2)的蛋白质提取物进行蛋白质印迹.标记显示在左侧,Cas9 蛋白的位置显示在右侧。使用针对 H3K14ac 的 Diagenode 抗体(货号 C15410310)进行蛋白质印迹分析 对整个细胞进行蛋白质印迹分析来自 HeLa 细胞的(25 μg,泳道 1)和组蛋白提取物(15 μg,泳道 2),以及使用 Diagenode 的 1 μg 重组组蛋白 H2A、H2B、H3 和 H4(分别为泳道 3、4、5 和 6)针对 H3K14ac 的抗体。抗体在含有 5% 脱脂牛奶的 TBS-Tween 中按 1:1,000 稀释。右侧标明了目的蛋白的位置;标记(以 kDa 为单位)显示在左侧。查看我们的选择!
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